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淺析基因電轉染儀脈沖過程
基因電轉染儀作為物理方法的一種，不僅能將DNA、RNA，還能將抗體、酶及其他生物活性分子轉入細菌、酵母、動物細胞和植物細胞。它是一種簡便的基因轉移系統(tǒng)，具有其他轉移方法不能對比的*性，如操作簡便、快捷，可重復性強，轉染率高，適用廣譜等，尤其對目前一般認為難轉的懸浮培養(yǎng)細胞也能獲得較高的轉染。
電穿孔法是通過電場作用于細胞幾微秒到幾毫秒之后，在細胞膜上暫時形成小孔或開口，把大分子如DNA等導入細胞并進入細胞核的技術。其過程簡述如下：首先在電擊過程中，細胞膜上出現(xiàn)穿孔，質(zhì)粒在電泳力的作用下與細胞膜接觸，并在細胞膜上電穿孔的區(qū)域形成一種可轉移的復合物。再次電擊后，質(zhì)粒脫離復合物并擴散至細胞質(zhì)內(nèi)，開始瞬轉；同時小部分質(zhì)粒進入核內(nèi)與染色體整合，開始穩(wěn)轉。一旦DNA擴散至細胞，膜上小孔會關閉。
淺析基因電轉染儀脈沖過程：
1）脈沖波形
脈沖波形主要分為兩種：1、方波脈沖；2、指數(shù)遞減波脈沖。方波脈沖是指：電壓瞬間升至預設電壓，保持電壓放電，然后瞬間終止放電。一般哺乳動物細胞電轉染時選擇方波脈沖，有較高的轉染效率和細胞存活率。指數(shù)遞減波脈沖是指：先對電容充電，然后讓電容*放電，其電壓變化呈指數(shù)遞減。一般這種波形的脈沖電轉染適用于細菌、酵母菌、昆蟲細胞。
2）脈沖時間
脈沖時間的選定主要取決與脈沖波形。在方波脈沖中，脈沖時間可直接設定。在指數(shù)遞減波脈沖中，脈沖時間是指電壓衰減至初始電壓1/3時所用的時間，等于電容（C）與電阻（R）的乘積，單位是ms。在參數(shù)優(yōu)化中，增加電壓應當降低脈沖時間，而減小電壓則應當增大脈沖時間。