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實驗動物丨使用Tonopen眼壓計測量大小鼠眼壓——探究小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞
目的
觀察青光安Ⅱ號方及其不同濃度有效組分對青光眼模型小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的保護作用及其作用機制。
實驗動物：選取8只正常對照的C57BL/6小鼠，以及48只38周齡的DBA/2J小鼠，后者用于建立慢性高眼壓青光眼模型。所有動物均獲得適宜的飼養(yǎng)條件和充足的食水。
分組與處理：DBA/2J小鼠隨機分為6組：模型組、益脈康分散片組、青光安Ⅱ號方湯劑組以及青光安Ⅱ號方有效組分的低、中、高濃度組。正常對照組C57BL/6小鼠灌胃蒸餾水。模型組小鼠也接受蒸餾水處理，而其他治療組小鼠分別接受相應(yīng)的藥物或有效組分的灌胃。
眼壓測量：所有動物在實驗開始前進行了為期3天的適應(yīng)性飼養(yǎng)。眼壓的測量是在小鼠清醒狀態(tài)下進行，由兩名實驗人員配合完成。使用Tono-pen AVIA接觸式眼壓計，每隔4周在上午9:00至12:00期間進行一次測量。每只小鼠的眼壓值取連續(xù)10次測量的平均值作為該次測量的結(jié)果，同時確保LCD上顯示的置信指標達到或超過95%，以保證測量數(shù)據(jù)的準確性與可靠性，為研究提供了可靠的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
視網(wǎng)膜組織學檢查：使用HE染色觀察視網(wǎng)膜組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化，通過TUNEL染色評估視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的凋亡情況。
統(tǒng)計分析：采用SPSS軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示，通過單因素方差分析（ANOVA）及后續(xù)多重比較測試來比較不同組之間的差異。P值小于0.05被認為具有統(tǒng)計學意義。
高濃度的青光安Ⅱ號方有效組分可以明顯改善青光眼模型小鼠的視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)，抑制視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞凋亡，激活Wnt/β-Catenin/Pax6信號通路，為青光眼的治療提供了新的研究方向和潛在的治療手段。
