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復蘇凍存細胞實驗2022/12/6
原理快速復蘇細胞，緩慢稀釋，以高細胞密度重新接種。材料與儀器步驟材料無菌培養(yǎng)瓶（如果需要離心時）生長培養(yǎng)基吸量管，1ml，10ml注射器和19號針頭（如果你使用玻璃凍存管）非滅菌保護性手套和面罩37℃...
脂質(zhì)體介導的瞬時轉(zhuǎn)染2022/12/6
材料與儀器L8057-Y10細胞D-PBSA培養(yǎng)瓶培養(yǎng)板F12FB培養(yǎng)基G418(Invitrogen)選擇性培養(yǎng)基電穿孔電穿孔專用杯電穿孔儀II電穿孔儀-II配套的效能擴增器-Plus步驟表達載體與...
倒置顯微鏡的使用2022/12/5
原理將培養(yǎng)物放在顯微鏡的載物臺上，打開電源，選擇合適的鏡頭，聚焦于標本。如果必要的話，將聚光器和相差環(huán)調(diào)節(jié)在中心。材料與儀器倒置顯微鏡擦鏡紙步驟確保顯微鏡（配有相差10×、20×或40×的物鏡及聚光器...
單層細胞的傳代2022/12/5
原理去除培養(yǎng)基，加人胰蛋白酶短暫作用，孵育，以培養(yǎng)基分散細胞，計數(shù)，稀釋并再接種。材料與儀器A549細胞WI-38MRC-5胰蛋白酶D-PBS70%乙醇噴壺生長培養(yǎng)基吸管離心管培養(yǎng)瓶移液器吸耳球吸水紙...
大鼠肝細胞分離實驗2022/12/5
原理經(jīng)肝門靜脈或肝門靜脈分支插管，用無鈣緩沖液灌洗肝15min，再用酶溶液灌洗15min。收集和洗滌細胞，計數(shù)有活力的肝細胞。材料與儀器L-15Leibovitz培養(yǎng)液HamF12培養(yǎng)液胞培養(yǎng)液HMM...
蛋白質(zhì)合成實驗2022/12/5
材料與儀器步驟材料無菌細胞培養(yǎng)，如1X104～1X106個細胞，24孔板3H-亮氨酸。無血淸培養(yǎng)基中2MBq/ml(～50uCi/ml)(特異活性并不重要，因為它將由培養(yǎng)基中的亮氨酸濃度決定）非無菌S...
分離ARVM細胞2022/12/5
材料與儀器鼠KH緩沖液混合氣體對流工作臺或?qū)恿魇匠瑑襞_乙酉迷罩冷凝器循環(huán)水浴和水浴搖床圈型架蠕動泵臺式醫(yī)用離心機無菌燒杯ColorpHastpH試紙步驟一、ARVM細胞分離的準備工作1.準備如下設備及...
分離雞胚背根神經(jīng)節(jié)2022/12/2
材料與儀器酶溶液DRG離心管培養(yǎng)皿解剖顯微鏡步驟解剖前在15ml離心管中配制酶溶液，置37℃水浴特用。2.解剖胚胎，解剖全過程保持組織濕潤。(1)殺死胚胎，去腿，放于100mm培養(yǎng)皿。(2)用鈍頭剪刀...
分離培養(yǎng)細胞2022/12/2
原理骨豁肌源性成肌細胞能夠培養(yǎng)從幾種成年動物骨骼肌分離的成肌細胞。在培養(yǎng)條件下，成肌細胞仍繼續(xù)表達一些分化特征。成肌細胞稱衛(wèi)星細胞，分化早期的步驟與骨骼肌很相似。成肌細胞在培養(yǎng)底物上增殖和遷移，然后成...
E玫瑰花環(huán)形成試驗2022/12/2
原理正常人外周血中T細胞在體外能直接和綿羊紅細胞（SRBC）結(jié)合形成玫瑰花樣細胞團。這是因為人的T細胞膜上具有能和SRBC膜上的糖蛋白相結(jié)合的受體，稱為E受體。已證實E受體是人T細胞所*的表面標志，因...
多潛能干細胞的誘導2022/12/2
簡介多潛能干細胞（in-ducedpluripotentstemcells，iPS）技術(shù)不僅可以解決胚胎干細胞來源引起的倫理問題，而且自體iPS細胞可以避免異體來源胚胎干細胞移植引起的免疫排斥反應。目...
大鼠肝癌模型法2022/12/2
原理1.Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導通路是一條在生物進化中極為保守的通路。在正常的體細胞中，β-catenin只是作為一種細胞骨架蛋白在胞膜處與E-cadherin形成復合體對維持同型細胞的黏附...
端粒顯示實驗2022/12/1
簡介端粒（telomere）是真核細胞染色體末端的DNA重復序列，它與多種端粒結(jié)合蛋白結(jié)合在一起，發(fā)揮重要的生物學功能，在細胞分裂的過程中，盡管端粒也會不斷的縮短，但可以通過端粒酶的催化，以自身RNA...
蛋白質(zhì)分離實驗2022/12/1
簡介蛋白質(zhì)分離的方法主要有3種：SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離蛋白質(zhì)、免疫沉淀法分離蛋白質(zhì)和雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離蛋白質(zhì)。原理SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離蛋白質(zhì)的基本原理是蛋白質(zhì)在SDS和巰基...
EB病毒轉(zhuǎn)化成淋巴細胞2022/12/1
材料與儀器全血刀豆凝集素ARPMI生長培養(yǎng)基離心管步驟混合10ml全血和10mlRPMI生長培養(yǎng)基。生長培養(yǎng)基（RPMI1640800ml，F(xiàn)BS200ml，2mmol/L-谷氨酰胺，5μg/ml兩性...
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