細(xì)胞運動觀察

時間：2023/1/12閱讀：2002

簡介

纖毛與鞭毛是單細(xì)胞或多細(xì)胞生物細(xì)胞表面伸出的特化結(jié)構(gòu)，其內(nèi)部是由微管組成的軸（軸中央由 2 條微管組成，外圍由 9 組二聯(lián)微管環(huán)繞），軸的基部與基體相連，周圍被細(xì)胞膜所包繞。直徑為 0.15～0.3 μm，屬于細(xì)胞的運動器官。其運動一般認(rèn)為是由二聯(lián)微管間的滑動所引起，鞭毛運動方式為波浪式、纖毛運動為波動式。

原理

細(xì)胞運動觀察實驗的基本原理是纖毛與鞭毛是單細(xì)胞或多細(xì)胞生物細(xì)胞表面伸出的特化結(jié)構(gòu)，其內(nèi)部是由微管組成的軸（軸中央由 2 條微管組成，外圍由 9 組二聯(lián)微管環(huán)繞），軸的基部與基體相連，周圍被細(xì)胞膜所包繞。直徑為 0.15～0.3 μm，屬于細(xì)胞的運動器官。其運動一般認(rèn)為是由二聯(lián)微管間的滑動所引起，鞭毛運動方式為波浪式、纖毛運動為波動式。

暗視野照明法是一種使照射被檢物體的光線不直接進入物鏡的照明方法。常用它觀察未染色的活體細(xì)胞或膠體粒子。利用此法，在顯微鏡下觀察時直接看不到通過標(biāo)本的照明光線，而是被檢物反射或衍射的光線進入物鏡，可提高分辨率，在暗視野中可以看到明亮的被檢物體的存在和運動，但它們的內(nèi)部結(jié)構(gòu)卻看不清楚。

材料與儀器

器材：

探針、蛙板、大頭針、蠟屑、載玻片、蓋玻片、解剖剪、鑷子、牙簽、吸管、平皿、普通光學(xué)顯微鏡、暗視野顯微鏡、蟾蜍。

試劑：

①蟾蜍生理鹽水。

步驟

基本過程可分為如下幾步：

（一）觀察蟾蜍上頜黏膜上皮細(xì)胞的纖毛運動

A 穿刺法處死蟾蜍取蟾蜍 1 只，左手食指和中指夾住蟾蜍前肢，無名指和小指夾住后肢，大拇指壓住頭部，使頭和軀干呈一定角度。孔手持解剖針，對準(zhǔn)頭和軀干背側(cè)相連的凹陷處（即枕骨大孔），以穿刺法搗毀腦和脊髓。當(dāng)蟾蜍四肢無力下垂時，即表明動物已死。

B 將蟾蜍腹部向上、固定在蛙板上。

C 沿蟾蜍兩側(cè)口角向后剪開約 1 cm，將下頜后翻固定在腹部。

D 在上頜中線距喉頭 1 cm 處放置蠟屑，觀察蠟屑向什么方向移動？記錄蠟屑開始移動到消失的時間。

E 用眼科剪剪取喉頭前部上頜黏膜組織約 4 mm x 4 mm 小塊，用牙簽挑取剪下的黏膜，將縱切面貼到載片上。

F 加 1 滴生理鹽水置載玻片的標(biāo)本上，加蓋玻片，光鏡下觀察。

（二）暗視野觀察蟾蜍精子的鞭毛運動

A 將前面實驗所用蟾蜍沿腹中線剪開，暴露出黃色圓柱狀精巢。

B 剪取一側(cè)精巢放置盛有自來水的平皿中，用鑷子夾住精巢的一端，清洗血污。

C 取洗凈的精巢放到另一干凈的平皿上，用眼科剪將精巢充分剪碎后，加入數(shù)滴自來水，混勻。

D 用吸管吸取平皿內(nèi)液體，滴 1 滴于載玻片上，蓋上蓋玻片，稍待 2～3 min，鏡下觀察。

注意事項

1 蟾蜍上頜黏膜上皮細(xì)胞的纖毛運動低倍鏡下觀察纖毛運動的現(xiàn)象，然后換高倍鏡仔細(xì)觀察纖毛有規(guī)律的運動。

2 暗視野觀察蟾蜍精子的鞭毛運動低倍鏡下可看到視野中有許多精子，頭部呈長錐形，尾為細(xì)長的線狀結(jié)構(gòu)；高倍鏡下，見有許多靠尾部鞭毛彎曲擺動驅(qū)使運動的精子。

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細(xì)胞運動觀察

（一）觀察蟾蜍上頜黏膜上皮細(xì)胞的纖毛運動

（二）暗視野觀察蟾蜍精子的鞭毛運動

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