目錄:上海安為生物科技有限公司>>細(xì)胞系/細(xì)胞株>>人源細(xì)胞系>> 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系HUVEC
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更新時(shí)間：2024-08-26 10:18:10瀏覽次數(shù)：569評(píng)價(jià)
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| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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HUVEC 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化
HUVEC【huve-c】 | |
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l 細(xì)胞鑒定 | 免疫熒光鑒定鑒定已通過(guò) |
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l 細(xì)胞來(lái)源 | 國(guó)家資源庫(kù)（上海中科院） |
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l 細(xì)胞背景 | 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系HUVEC比較久之前由美國(guó)ATCC建系， 后來(lái)被廣泛使用，但是近些年發(fā)現(xiàn)細(xì)胞源頭存在交叉污染，目前已經(jīng)被國(guó)際下架，美國(guó)也發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞存在問(wèn)題，于是新建一個(gè)全新的HUVE-C 但是目前這個(gè)細(xì)胞引進(jìn)到國(guó)內(nèi)后種子都狀態(tài)很差，不能使用。因此市場(chǎng)上很難找到可以使用的狀態(tài)好的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVE-C細(xì)胞。本公司也是由于沒(méi)有合適的細(xì)胞同時(shí)狀態(tài)好也準(zhǔn)確，所以我們做了國(guó)內(nèi)原代細(xì)胞永生化建系得到一個(gè)全新的準(zhǔn)確細(xì)胞：人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞。提供單個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞marker免疫熒光鑒定。細(xì)胞叫：人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞，和huve-c是同一個(gè)類型的細(xì)胞，都是屬于人的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，只是叫法不同，并且由于是國(guó)內(nèi)建系的，因此不能提供STR鑒定，而是提供免疫熒光鑒定。 |
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l 細(xì)胞特性
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1） 來(lái)源：人臍帶組織
2） 形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣 貼壁生長(zhǎng)
3） 含量：>1x106 細(xì)胞數(shù)
4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途：僅供科研使用。 |
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l 培養(yǎng)條件： | 1）準(zhǔn)備內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系（推薦：PriMed-awcell-002）
內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基 93%
胎牛血清（FBS） 5%
內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 1%
青霉素/鏈霉素，P/S 1% 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 |
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l 注意事項(xiàng)：
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人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系HUVEC對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。 |
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l 運(yùn)輸形式： |
低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
常溫（2） T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。 |
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l 生物安全 | 1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意：凍存管浸沒(méi)在液氮中會(huì)泄漏，并會(huì)慢慢充滿液氮。解凍時(shí)，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。 |
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