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PriCells: 正?;は赴嘌?/strong> 实验材料:1. 实验动物:大鼠、兔,人手术切除的关节等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 培养液:RPMI1640培养基,补加15%小牛血清; 实验方法:1. 将大鼠处死后,用75%酒精消毒;2. 用手术剪剖开其四肢皮肤与肌肉,暴露长骨两端的关节,取出关节面滑膜组织置于盛有缓冲液的培养皿中;3. 剔除滑膜组织外层结构及周边软骨组织,用缓冲液洗2—3次;4. 将滑膜组织置于盛有少量小牛血清的培养皿中,剪碎成1mm×1mm×1mm大小的植块;5. 将制备的植块接种到螺旋口培养瓶中。反转培养瓶,使植有组织块的一面朝上,加入培养液,盖好瓶盖。将培养瓶放入含5%CO2的培养箱中在37℃条件下进行培养;6. 培养4h后,组织块较牢黏附于瓶底时,再轻轻反转培养瓶,继续培养;7. 培养3d后换培养液; PriCells提供:1. 各种原代细胞特制基础培养基;2. 各种原代细胞培养特制添加剂;3. 原代细胞分离试剂盒;4. 原代细胞鉴定试剂盒;5. 原代细胞总蛋白质抽提物;6. 原代细胞总RNA;7. 原代细胞总DNA;
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实验材料:
1. 实验动物:大鼠、兔,人手术切除的关节等;
2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;
3. 培养液:RPMI1640培养基,补加15%小牛血清;
实验方法:
1. 将大鼠处死后,用75%酒精消毒;
2. 用手术剪剖开其四肢皮肤与肌肉,暴露长骨两端的关节,取出关节面滑膜组织置于盛有缓冲液的培养皿中;
3. 剔除滑膜组织外层结构及周边软骨组织,用缓冲液洗2—3次;
4. 将滑膜组织置于盛有少量小牛血清的培养皿中,剪碎成1mm×1mm×1mm大小的植块;
5. 将制备的植块接种到螺旋口培养瓶中。反转培养瓶,使植有组织块的一面朝上,加入培养液,盖好瓶盖。将培养瓶放入含5%CO2的培养箱中在37℃条件下进行培养;
6. 培养4h后,组织块较牢黏附于瓶底时,再轻轻反转培养瓶,继续培养;
7. 培养3d后换培养液;
PriCells提供:
1. 各种原代细胞特制基础培养基;
2. 各种原代细胞培养特制添加剂;
3. 原代细胞分离试剂盒;
4. 原代细胞鉴定试剂盒;
5. 原代细胞总蛋白质抽提物;
6. 原代细胞总RNA;
7. 原代细胞总DNA;