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PriCells: 正常兔食管上皮细胞培养
PriCells: 正常兔食管上皮细胞培养
实验材料：
1. 大兔的正常食管组织
2. 6孔培养板：用多聚赖氨酸4℃包被过夜
3. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素，pH7.4
4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪，眼科镊
实验方法：
1. 处死大兔，取正常食管组织放入含双抗的PBS（pH=7.2）中反复清洗3次，以洗去组织表面的血丝及粘液；
2. 小心的用眼科剪镊将食管黏膜与黏膜下组织分离；
3. 分离出的粘膜组织用含双抗的PBS（pH=7.2）反复冲洗若干次；
4. 将清洗后食管黏膜组织剪成1mm3左右大小的组织块；
5. 再次用含双抗的PBS（pH=7.2）反复清洗，直至清洗液清亮为止；
6. 将黏膜组织块按1块/cm2的密度接种于6孔培养板中，上皮面朝下；
7. 将贴满组织块的培养板室温放置5~10分钟，待组织块贴壁后，转入37℃、5%CO2的培养箱中静置培养。
8. 静置2h左右，待组织块基本不会浮起后，加入0.5-1ml培养液，置于37℃、5%CO2的培养箱中继续培养。3-4天后有上皮细胞从组织边缘爬出，7天左右铺满板面。
PriCells提供：
1. 各种原代细胞特制基础培养基；
2. 各种原代细胞培养特制添加剂；
3. 原代细胞分离试剂盒；
4. 原代细胞鉴定试剂盒；
5. 各种原代细胞DNA；
6. 各种原代细胞RNA；
7. 各种原代细胞蛋白质；