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武汉原生原代生物医药科技有限公司

PriCells: 正常人食管黏膜上皮细胞培养

时间:2021-9-27 阅读:306
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PriCells: 正常人食管黏膜上皮细胞培养
 
实验材料:
1. 一般采用活检时获得的正常食管黏膜组织
2. 不含Ca2+和Mg2+的1×HBSS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和1.5g/L庆大霉素,pH7.4
3. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊
4. 离心管(15ml、50ml)
 
实验方法:
1. 食管黏膜组织放入HBSS中,在解剖显微镜下分离黏膜与黏膜下组织,用HBSS冲洗2-3次,将黏膜剪成约1mm3大小的组织块。
2. 1块/cm2的密度将植块放入培养皿中,上皮面朝下;也可在培养皿内放入盖玻片,将组织块放在盖玻片上培养。
3. 当组织块贴壁后,加入适量培养液,培养液的量为能湿润组织块但不使组织块浮起为宜,在37℃、5%CO2培养箱内静置培养。
4. 组织块贴壁1-3d后,补充培养液。以后每隔2-3d换液1次。
5. 植块培养3d后,细胞从植块边缘迁出。1周后,细胞向外迁移扩展,并逐渐分化,细胞的形态逐渐趋向正常食管黏膜上皮细胞的形态学特征。靠近植块的细胞体积小,类似基底细胞。外侧的细胞扁平,为分化的上皮细胞。2周后,细胞开始出现凋亡形态。3周后,近侧细胞减少,甚至消失。剩余的大部分细胞呈分化状态。
 
PriCells提供:
1. 各种原代细胞特制基础培养基;
2. 各种原代细胞培养特制添加剂;
3. 原代细胞分离试剂盒;
4. 原代细胞鉴定试剂盒;
5. 各种原代细胞DNA;
6. 各种原代细胞RNA;
7. 各种原代细胞蛋白质;


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