PriCells: 动物淋巴管内皮细胞的分离

基本方案2：

植块培养法

实验材料：

1. 哺乳动物胸导管或肠系膜淋巴管

2. 1%明胶铺底，置超净台晾干

3. 1×PBS，含青霉素100u/ml和链霉素100μg/ml，pH7.4

4. 眼科剪，眼科镊

5. 慕丝线（7号线）、细铁丝

6. 离心管（15ml、50ml）

实验方法：

1. 处死动物后，打开胸腔，分离胸导管，在胸导管上端结扎，切取10-15cm的一段。将胸导管放入预冷PBS中漂洗。

2. 在解剖显微镜下，用眼科剪和眼科镊剥除外膜的脂肪和纤维组织，然后用PBS反复冲洗3次。用虹膜剪纵向切开管腔，再用PBS冲洗管腔面。然后，将管腔剪成约1mm3的小块。

3. 将组织快放入培养皿中，使内膜面朝下，放入37℃，含5%CO2的孵箱中培养4h。加入培养液，胸导管组织块能否贴壁是内皮细胞培养的关键。因此，加入培养液时操作要轻，以免使组织块浮起。

4. 静置培养3d后换液，以后每隔2-3d换液1次。培养4-6d后，内皮细胞开始自植块长出，细胞呈长梭形或多边形。2-3周后，细胞生长形成单层。待细胞生长形成单层时，可传代培养。

5. PriCells-原代内皮细胞特制基础培养基

6. PriCells-原代内皮细胞培养特制添加剂

7. PriCells-原代细胞分离试剂盒

8. PriCells-原代细胞鉴定试剂盒