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武汉原生原代生物医药科技有限公司

PriCells: 牛或猪大血管原代内皮细胞的分离-灌注酶消化法

时间:2021-9-23 阅读:235
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PriCells: ?;蛑泶笱茉谄は赴姆掷?灌注酶消化法
实验材料:
1.    ?;蛑?/div>
2.    PBS,含青霉素100U/ml和链霉素100μg/ml
3.    0.1%Ⅰ型胶原酶
4.    眼科剪,眼科镊
5.    慕丝线

6.    离心管(15ml、50ml)


实验方法:
1.    分离?;蛑淼闹鞫龅却笱埽?5-20cm,用丝线结扎血管各分支后,取出主动脉。放入含青霉素100U/ml和链霉素100μg/ml的PBS中,清洗血管,洗净血迹。
2.    用眼科剪和眼科镊剔除血管外膜的脂肪和结缔组织,用加入抗菌素的PBS冲洗三次。
3.    从血管动脉端注入0.1%Ⅰ型胶原酶溶液,待血管内残留的PBS全部流出后,结扎血管静脉端,继续注入胶原酶溶液,使血管充盈。在室温下消化约30min。
4.    将血管内消化液收集到灭菌的离心管内,1000r/min,离心10min。吸去上清,加入培养液制成细胞悬液。调整细胞密度至1.5×105个/ml。
5.    PriCells-原代内皮细胞特制基础培养基
6.    PriCells-原代内皮细胞培养特制添加剂
7.    PriCells-原代细胞分离试剂盒


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