本试剂盒采用双抗体夹心两步法酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被抗人性激素结合球蛋白(SHBG)抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入人性激素结合球蛋白(SHBG)校准品和待测样本，再加入shengwusu标记抗体，经过温育与充分洗涤后，再加入HRP偶联的亲和素，经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-shengwusu标记抗体-亲和素酶的夹心复合物。加底物A和B，产生蓝色产物，在终止液作用下，最终转化为黄色，在酶标仪450nm波长上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中人性激素结合球蛋白(SHBG)的浓度正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本中人性激素结合球蛋白(SHBG)的浓度。
操作步骤
推荐样本稀释方案：建议先做预实验摸索样本适合稀释倍数，然后再做正式实验。
所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
3、设置标准品孔、yangben稀释液孔、空白孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL，yangben稀释液孔加yangben稀释液50μL，空白孔不加，样本孔加待测样本50μL。除空白孔外，每孔加入shengwusu抗体100uL，用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱避光温育60min。
4、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复5次。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡30s的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。
5、除空白孔外，每孔加入HRP标记亲和素100uL，用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱避光温育20min。
6、重复步骤4。
7、将底物A和B按1:1体积充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱避光温育15min。
所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
3、设置标准品孔、yangben稀释液孔、空白孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL，yangben稀释液孔加yangben稀释液50μL，空白孔不加，样本孔加待测样本50μL。除空白孔外，每孔加入shengwusu抗体100uL，用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱避光温育60min。
4、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复5次。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡30s的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。
5、除空白孔外，每孔加入HRP标记亲和素100uL，用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱避光温育20min。
6、重复步骤4。
7、将底物A和B按1:1体积充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱避光温育15min。
8、所有孔加入终止液50μL，在450nm波长酶标仪上读取各孔吸光度（OD值）。
备注：图片仅供参考。仅供科研，不可用于临床。
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