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上海禾午生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第4年

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P233-pLKO-p53-shRNA-427基因沉默質(zhì)粒
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pLKO-p53-shRNA-427基因沉默質(zhì)粒
別名TP53下調(diào)質(zhì)粒
啟動(dòng)子U6
復(fù)制子pUC ori,F1 ori,SV40 ori
終止子cPPT/CTS , 3
質(zhì)粒分類RNA文庫(kù)質(zhì)粒;RNA人源質(zhì)粒;shRNA人源質(zhì)粒
質(zhì)粒大小7083bp
原核抗性Amp
真核抗性Puro
克隆菌株Stbl3
培養(yǎng)條件37℃
表達(dá)宿主293T等哺乳細(xì)胞
培養(yǎng)條件37℃,5%CO2

一、載體構(gòu)建的基本實(shí)驗(yàn)步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備;
(2)目的DNA片段和載體的連接;
(3)連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化;
(4)克隆篩選。
(5)測(cè)序驗(yàn)證及結(jié)果交付

 

二、詳細(xì)內(nèi)容
1、以PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)的各類載體構(gòu)建,如大腸桿菌表達(dá)載體、酵母表達(dá)載體、桿狀病毒表達(dá)載體、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體;報(bào)告基因載體等;
2、基因定點(diǎn)突變,包括單點(diǎn)突變,多點(diǎn)突變,基因缺失等;
3、載體元件替換和改造;
4、siRNA載體和miRNA表達(dá)載體構(gòu)建;
5、過(guò)表達(dá)載體構(gòu)建。

 

pLVshRNA-U6-CCNDBP1(human)-shRNA1-PGK-EGFP(2A)Puro基因沉默質(zhì)粒
pLVshRNA-U6-IQGAP1(mouse)-shRNA3-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質(zhì)粒
pLVshRNA-U6-RAB11FIP2(mouse)-shRNA2-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質(zhì)粒
pLVshRNA-U6-IQGAP1(mouse)-shRNA2-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質(zhì)粒
pLVshRNA-U6-RAB11FIP2(mouse)-shRNA1-PGK-EGFP-E2A-Pur基因沉默質(zhì)粒
pLVshRNA-U6-EDAR(human)-shRNA5-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質(zhì)粒
pLVshRNA-U6-EDAR(human)-shRNA6-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質(zhì)粒
pCAG-VSVG輔助包裝質(zhì)粒
pLVshRNA-U6-CSTF2(human)-shRNA2-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質(zhì)粒
pLVshRNA-U6-CSTF2(human)-shRNA1-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默質(zhì)粒

 

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