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P3033-pLVX-Puro蛋白表達質粒
  • P3033-pLVX-Puro蛋白表達質粒

貨物所在地:上海上海

地: 上海

更新時間:2025-05-08 21:00:08

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pLVX-Puro蛋白表達質粒
啟動子CMV
復制子pUC
終止子SV40 poly(A) signal
質粒分類病毒系列,慢病毒克隆質粒
質粒大小8102bp
原核抗性Amp
篩選標記Puro
克隆菌株Stbl3
培養(yǎng)條件37℃
表達宿主哺乳細胞
誘導方式無須誘導,瞬時表達
5'測序引物CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG
3'測序引物根據(jù)序列設計引物

注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。
1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min

2、從-80冰箱中取出相應的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標記;

3、取2μl質粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min;

4、42熱激90s,再冰浴2min

5、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min;

66000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h;

9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實驗需要提取質粒

 

pLKO.1-PMP22shRNA2基因沉默質粒
pLKO.1-PMP22shRNA4基因沉默質粒
pCS2-EGFP-MCS-3×FLAG蛋白表達質粒
pFUGW-H1基因沉默質粒
pBV220-Cam蛋白表達質粒
pTrc99a-Kan蛋白表達質粒
pLentiCRISPRV2-ANO6(mouse)-sgRNA3基因編輯質粒
pLentiCRISPRV2-TRPC1(mouse)-sgRNA3基因編輯質粒
pLentiCRISPRV2-NANOG(human)-sgRNA1基因編輯質粒
pCAG-VSVP輔助包裝質粒
pCAG-VSVN輔助包裝質粒

 

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