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P3144-pLKO.1-EGFP-Puro基因沉默质粒
  • P3144-pLKO.1-EGFP-Puro基因沉默质粒

货物所在地:上海上海

地: 上海

更新时间:2025-05-08 21:00:08

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pLKO.1-EGFP-Puro基因沉默质粒
启动子U6
复制子pUC
原核抗性Amp
真核抗性Puro
克隆菌株Stbl3
培养条件37℃
表达宿主哺乳细胞
质粒宿主哺乳细胞,慢病毒
质粒用途基因沉默
片段类型shRNA
原核抗性氨苄青霉素
真核抗性嘌呤霉素

注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0  1*TE缓冲液来溶解质粒,室温放置1min;

2、从-80冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min

4、42热激90s,再冰浴2min;

5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min

6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒

 

pCDH-CMV-MCS-EF1-Hygro蛋白表达质粒
pLKO.1-EGFP-Puro基因沉默质粒
pLVX-TetOne-Puro蛋白表达,诱导质粒
pLVML-3×FLAG-MCS-Puro蛋白表达质粒
pCDH-CMV-MCS-EF1-turboRFP-T2A-Puro蛋白表达质粒
pDC316-ZsGreen1-shRNA基因沉默质粒
041 pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean基因沉默质粒
pSIH1-H1-copGFP-T2A-Puro基因沉默质粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro基因沉默质粒
pLVX-shRNA2基因沉默质粒

 

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