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P6189-Tet-pLKO-Puro-PMP22-shRNA2基因沉默质粒
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货物所在地:上海上海

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更新时间:2025-05-08 21:00:08

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Tet-pLKO-Puro-PMP22-shRNA2基因沉默质粒
启动子H1-2O2
原核抗性Amp
真核抗性Puro
克隆菌株Stbl3
培养条件LB/37℃

注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0  1*TE缓冲液来溶解质粒,室温放置1min

2、从-80冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;

442热激90s,再冰浴2min;

5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;

6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒

 

pTrcHis2A蛋白表达质粒
pHY-P43蛋白表达质粒
pMA0911蛋白表达,分泌质粒
pBE2R蛋白表达,分泌质粒
pBE980a蛋白表达,分泌质粒
pHP13-P43蛋白表达质粒
pPIC9K-His蛋白表达质粒

 

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