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P7005-pAC5.1b-EGFP-V5-6×His蛋白表達質(zhì)粒
  • P7005-pAC5.1b-EGFP-V5-6×His蛋白表達質(zhì)粒

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地: 上海

更新時間:2025-05-08 21:00:08

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pAC5.1b-EGFP-V5-6×His蛋白表達質(zhì)粒
原核抗性Amp
克隆菌株DH5α
培養(yǎng)條件37℃
質(zhì)粒宿主昆蟲細胞
質(zhì)粒用途蛋白表達
原核抗性氨芐青霉素
熒光標(biāo)記綠色

注意事項:轉(zhuǎn)化前請準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。
1、收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質(zhì)粒,室溫放置1min;

2、從-80冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標(biāo)記;

3、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min

4、42熱激90s,再冰浴2min

5、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min;

6、6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7、混勻后的菌液加至對應(yīng)抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h;

9、挑取單克隆菌落至對應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實驗需要提取質(zhì)粒

 

pAC5.1b-EGFP蛋白表達質(zhì)粒
pLKO.1-shTAZ基因沉默質(zhì)粒
pMal-6×His-c4X蛋白表達質(zhì)粒
Tet-pLKO-Puro-PMP22-shRNA4基因沉默,誘導(dǎo)質(zhì)粒
Tet-pLKO-Puro-PMP22-shRNA3基因沉默,誘導(dǎo)質(zhì)粒
Tet-pLKO-Puro-PMP22-shRNA2基因沉默,誘導(dǎo)質(zhì)粒
pAcGP67B蛋白表達質(zhì)粒

 

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