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上海禾午生物科技有限公司
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當(dāng)前位置:上海禾午生物科技有限公司>>質(zhì)粒菌株>>質(zhì)粒>> P72354pT3-EF1a-HA

pT3-EF1a-HA

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號P72354

品       牌禾午生物

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時間:2025-06-15 07:50:40瀏覽次數(shù):81次

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供貨周期 兩周 規(guī)格
貨號 P72354 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
主要用途 僅供科研
名稱pT3-EF1a-HA
別稱-
質(zhì)粒宿主哺乳細胞
質(zhì)粒用途蛋白表達

名稱pT3-EF1a-HA
別稱-
質(zhì)粒宿主哺乳細胞
質(zhì)粒用途蛋白表達
片段類型ORF
片段物種空載體
原核抗性Amp
啟動子EF1a
復(fù)制子pUC
感受態(tài)DH5a
溫度37度
背景載體pT3-myr-AKT-HA(mouse)
正向引物PEF-F

 


注意事項:轉(zhuǎn)化前請準確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。


1
、收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質(zhì)粒,室溫放置1min;

2
、從-80冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標記;

3
、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min

4
、42熱激90s,再冰浴2min;

5
、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min;

6
6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7
、混勻后的菌液加至對應(yīng)抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8
、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h;

9
、挑取單克隆菌落至對應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實驗需要提取質(zhì)粒


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