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供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2
貨號(hào)	BFN60804689	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途	僅供科研

細(xì)胞名稱	人胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞BON-1
貨物編碼	BFN60804689
產(chǎn)品規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1	1.5ml凍存管x2
細(xì)胞數(shù)量	1x10^6	1x10^6
保存溫度	37℃	-198℃
運(yùn)輸方式	常溫保溫運(yùn)輸	干冰運(yùn)輸
安全等級(jí)	1
用途限制	僅供科研 2類

培養(yǎng)體系	DMEM高糖培養(yǎng)基+10%FBS+1%三抗
培養(yǎng)溫度	37℃	二氧化碳濃度	5%
簡(jiǎn)介	人胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞BON-1取自28歲男性供體
注釋	Doubling time: 1.5 +- 0.4 days (PubMed=29330294). Omics: Deep exome analysis.
STR信息	/
參考文獻(xiàn)	PubMed=1712329; DOI=10.5555/uri:pii:0016508591900045 Evers B.M., Townsend C.M. Jr., Upp J.R. Jr., Allen E., Hurlbut S.C., Kim S.W., Rajaraman S., Singh P., Reubi J.C., Thompson J.C. Establishment and characterization of a human carcinoid in nude mice and effect of various agents on tumor growth. Gastroenterology 101:303-311(1991) PubMed=7978888; DOI=10.1111/j.1749-6632.1994.tb17289.x Evers B.M., Ishizuka J., Townsend C.M. Jr., Thompson J.C. The human carcinoid cell line, BON. A model system for the study of carcinoid tumors. Ann. N. Y. Acad. Sci. 733:393-406(1994) PubMed=8108375; DOI=10.1097/00006676-199401000-00013 Parekh D., Ishizuka J., Townsend C.M. Jr., Haber B., Beauchamp R.D., Karp G., Kim S.W., Rajaraman S., Greeley G. Jr., Thompson J.C. Characterization of a human pancreatic carcinoid in vitro: morphology, amine and peptide storage, and secretion. Pancreas 9:83-90(1994) PubMed=19295186; DOI=10.1159/000209330 Siddique Z.-L., Drozdov I., Floch J., Gustafsson B.I., Stunes K., Pfragner R., Kidd M., Modlin I.M. KRJ-I and BON cell lines: defining an appropriate enterochromaffin cell neuroendocrine tumor model. Neuroendocrinology 89:458-470(2009) PubMed=22538498; DOI=10.1159/000338793 Grozinsky-Glasberg S., Shimon I., Rubinfeld H. The role of cell lines in the study of neuroendocrine tumors. Neuroendocrinology 96:173-187(2012) PubMed=22929519; DOI=10.3791/4218 Wong C., Vosburgh E., Levine A.J., Cong L., Xu E.Y. Human neuroendocrine tumor cell lines as a three-dimensional model for the study of human neuroendocrine tumor therapy. J. Vis. Exp. 66:e4218-e4218(2012) PubMed=26087898; DOI=10.1016/j.cancergen.2015.04.002 Boora G.K., Kanwar R., Kulkarni A.A., Pleticha J., Ames M., Schroth G., Beutler A.S., Banck M.S. Exome-level comparison of primary well-differentiated neuroendocrine tumors and their cell lines. Cancer Genet. 208:374-381(2015) PubMed=29330294; DOI=10.1158/1541-7786.MCR-17-0163 Benten D., Behrang Y., Unrau L., Weissmann V., Wolters-Eisfeld G., Burdak-Rothkamm S., Stahl F.R., Anlauf M., Grabowski P., Mobs M., Dieckhoff J., Sipos B., Fahl M., Eggers C., Perez D., Bockhorn M., Izbicki J.R., Lohse A.W., Schrader J. Establishment of the first well-differentiated human pancreatic neuroendocrine tumor model. Mol. Cancer Res. 16:496-507(2018) PubMed=29895527; DOI=10.1530/ERC-18-0159 Aristizabal Prada E.T., Spottl G., Maurer J., Lauseker M., Koziolek E.J., Schrader J., Grossman A., Pacak K., Beuschlein F., Auernhammer C.J., Nolting S. The role of GSK3 and its reversal with GSK3 antagonism in everolimus resistance. Endocr. Relat. Cancer 25:893-908(2018)

驗(yàn)收細(xì)胞注意事項(xiàng)

1、收到人胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞BON-1，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請(qǐng)盡快聯(lián)系。

2、收到人胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞BON-1，如包裝完好，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時(shí)左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理。

3、收到人胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞BON-1后，請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)離心收集細(xì)胞，接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞，若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到 80%左右，血清濃度還是在 10％。

4、收到人胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞BON-1時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過(guò) 80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。

5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時(shí)之需。

6、24 小時(shí)后，人胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤細(xì)胞BON-1恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn)）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般 1-3 分鐘，不超過(guò) 5 分鐘?？梢苑?/span>入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁，見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái)，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀，有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。