DH5α-λpir 化学感受态细胞

产品规格CAT#: BFNC86002-01(10×100ul)/BFNC86002-02(50×100ul)

DH5α λpir：                                              100μl/支

pUC19 (control vector，10pg/μl):                   10μl

保存条件(保质期)：                            -80℃（6个月）

基因型

F- φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) LAMpir U169 endA1 recA1 hsdR17(r_k^-,m_k⁺) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA

产品说明

DH5α λpir菌株来源于DH5α，在DH5α大肠杆菌基因组中引入LAMpir，即为DH5α λpir，该菌株可以表达 PIR蛋白，使得含有R6Kg ori复制子的质?？梢栽谄渲姓８粗?。 DH5α λpir菌株缺失核酸内切酶 (endA)，提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型 (recA)减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA 的稳定性；lacZΔM15的存在使DH5α可用于蓝、白斑筛?。坏獶H5α λpir菌株生长速度较慢，在平板培养或液体摇菌时应延长生长时间。

青旗生物生产的DH5α λpir感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>1×10⁹ cfu/μg DNA。

DH5α-λpir 化学感受态细胞

操作方法

1. DH5α λpir感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手bo打EP管底混匀，冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏70分钟。

4. 5000 rpm离心1分钟收集菌体，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱至少18小时。

注意事项

1. 感受态细胞在冰中缓慢融化。插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。

2. DH5α λpir菌株生长缓慢，在平板上培养或液体摇菌时应延长菌体生长时间（37℃，18小时以上）。

3. 转化高浓度的质?；蚋咝实牧硬锟上嘤跎僦沼糜谕堪宓木?。