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青旗(上海)生物技术发展有限公司
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植物茉莉酸(JA)ELISA试剂盒

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所  在  地上海市

更新时间:2021-01-28 22:34:41浏览次数:1864次

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供货周期 现货 规格 48T/96T
货号 BFNE89170 应用领域 生物产业
主要用途 仅用于科研
产品名称:植物茉莉酸(JA)ELISA试剂盒

目的:本试剂盒用于测定植物相关液体样本中茉莉酸(JA)的含量。

产品名称:植物茉莉酸(JA)ELISA试剂盒 

 

样本处理及要求:
1.血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收 集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心20分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

 

操作步骤
1.标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.加酶:每孔加入酶标试剂 100μl,空白孔除外。
4.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 60 分钟。
5.配液:将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用。
6.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
7.显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
8.终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
9.测定:以空白孔调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

 

 植物茉莉酸(JA)ELISA试剂盒 

 

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