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His-tag是由6个C?H?N?O?组成的短肽，分子量很小，不会遮盖融合蛋白中其他蛋白的表位和结构域，也不会影响蛋白的结构和功能。带有His标签的蛋白，与琼脂糖凝胶或磁珠上的螯合金属离子Ni2+形成配位键特异性的结合，而被纯化。金斯瑞提供His标签蛋白分离纯化的镍填料、镍磁珠和镍填料预装柱等，用于His标签蛋白的分离纯化。
Ni2+离子的螯合剂有：三配位的亚氨基二乙酸（IDA）、四配位的氮川三乙酸（NTA）和五配位的三（羧甲基）乙二胺（TED）。蛋白质的吸附量的排列顺序为：IDA>NTA>TED；还原剂的耐受力的排列顺序为：TED>NTA>IDA。
螯合金属Ni2+离子的螯合剂是偶联在琼脂糖凝胶介质上的，一般4%的琼脂糖凝胶基质适用于手动或蠕动泵的重力柱纯化，金斯瑞提供的填料有Ni-IDA亲和层析介质（L00223I）、Ni-NTA纯化介质（ L00250）。一般6%的琼脂糖凝胶基质可耐受0.3MPa压力，适用于AKTA等纯化设备，金斯瑞提供的填料有：Ni-IDA Resin FF（L00465）、 Ni-NTA填料High Affinity Ni-Charged Resin FF（L00666）、Ni-TED填料High Affinity Ni-TED Resin FF（L00885），预装柱有：Ni-IDA Resin FF预装柱（L00684）和Ni-NTA预装柱High Affinity Ni-Charged Resin FF Prepacked Column（L00683）。
His标签蛋白纯化填料及磁珠选择指南
| 产品名称 | 配基 | 基质 | 动态载量 | 产品编号 | 应用 |
|---|---|---|---|---|---|
| High Affinity Ni-TED Resin FF | TED | 6%琼脂糖 | 10mg/ml | L00885 New | 重力柱纯化&仪器纯化，纯度高，化学试剂耐受性更强 |
| High Affinity Ni-Charged Resin FF | NTA | 6%琼脂糖 | ≥50mg/ml | L00666 Hot | 重力柱纯化&仪器纯化，载量很高，纯度很高，性价比高 |
| Ni-NTA Resin | NTA | 4%琼脂糖 | >20mg/ml | L00250 | 重力柱纯化，载量较高，纯度较高 |
| Ni Resin FF | IDA | 6%琼脂糖 | >40mg/ml | L00465 | 重力柱纯化 & 仪器纯化，载量较高，成本较低 |
| Ni-IDA Resin | IDA | 4%琼脂糖 | 20mg/ml | L00223I | 重力柱纯化，载量高，成本很低 |
| 预装柱 | |||||
|---|---|---|---|---|---|
| 产品名称 | 配基 | 基质 | 动态载量 | 产品编号 | 应用 |
| High Affinity Ni-Charged Resin FF Prepacked Column | NTA | 6%琼脂糖 | >40mg/ml | L00683 | 仪器纯化，载量高，纯度很高 |
| Ni-IDA Resin FF Prepacked Column | IDA | 6%琼脂糖 | >40mg/ml | L00684 | 仪器纯化，载量较高 |
| 纯化分离磁珠 | |||||
|---|---|---|---|---|---|
| 产品名称 | 配基 | 基质 | 参考载量 | 产品编号 | 应用 |
| AmMag™ Ni Magnetic beads | TED | 超顺4%琼脂糖磁珠 | 10mg/ml | L00776 New | 磁力架或纯化仪器，纯度高，化学试剂耐受性强 |
| Ni-charged MagBeads | NTA | >40mg/ml | L00295 | 磁力架或纯化仪器，载量高，纯度高 | |
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