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介紹透射電鏡的樣品準(zhǔn)備的2種方法
透射電鏡是一種綜合性大型分析儀器，在現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的研究開(kāi)發(fā)工作中被廣泛地使用。由于透射電鏡能觀察的樣品必須很薄(60～70nm)，所以透射電鏡的樣品準(zhǔn)備要求很?chē)?yán)格，方法也很單一。一般有以下兩種方法：
一、負(fù)染色技術(shù)
負(fù)染色技術(shù)簡(jiǎn)單快速，可以顯示生物大分子、細(xì)菌、分離的細(xì)胞器以及蛋白晶體等樣品的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、大小以及表面結(jié)構(gòu)的特征。尤其在病毒學(xué)中，負(fù)染色技術(shù)有著廣泛的應(yīng)用。
樣品要求：①透射電鏡樣品懸液的純度不要求很純，但是如果雜質(zhì)太多，如大量的細(xì)胞碎片，培養(yǎng)基殘?jiān)?，糖?lèi)以及各種鹽類(lèi)結(jié)晶的存在都會(huì)干擾染色反應(yīng)和透射電鏡的觀察。尤其是不能有過(guò)多的糖類(lèi)，因?yàn)樵陔娮邮霓Z擊下，糖類(lèi)容易碳化而有礙觀察，因此樣品要適當(dāng)提純。②樣品懸液的濃度要適中，太稀在透射電鏡下很難找到樣品，太濃樣品堆積影響觀察。
操作流程：吸取樣品懸液滴到有膜的銅網(wǎng)上，靜置數(shù)分鐘，然后用濾紙吸去多余的液體，滴上負(fù)染色液，染色1～2min后濾紙吸去負(fù)染色液，待干后用于透射電鏡觀察。
二、超薄切片技術(shù)
超薄切片技術(shù)是為透射電鏡觀察提供薄樣品的專(zhuān)門(mén)技術(shù)，是生物學(xué)中研究細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)Z常用的技術(shù)。廣泛應(yīng)用于生物體的各種細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)觀察。一般厚度在10～100nm的切片稱(chēng)為超薄切片，制作這種切片的技術(shù)叫做超薄切片技術(shù)。超薄切片制作的過(guò)程包括取材、固定、脫水、滲透、包埋、聚合、切片和染色等幾個(gè)環(huán)節(jié)，和一般光學(xué)顯微鏡的石蠟切片過(guò)程相似。但是，超薄切片切片過(guò)程更為細(xì)致與復(fù)雜，要求更嚴(yán)格，而且所用的試劑比較昂貴、配制復(fù)雜、強(qiáng)致癌。