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LBA4404化转根癌农杆菌感受态

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更新时间:2023-04-26 19:59:29浏览次数:620

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产品简介

供货周期 现货 应用领域 生物产业
LBA4404化转根癌农杆菌感受态
产品简介本菌株含有 pRARE2 质粒,除了能够提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的
AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六个稀有密码子的 tRNA 外,还提供了第七个稀有密码子
CGG 的 tRNA。Rosetta2 载体通过提供稀有密码子,使得该宿主菌相对于其他大肠杆菌

详细介绍

LBA4404化转根癌农杆菌感受态

产品简介

Rosetta 2 来源于 Rosetta,本菌株含有 pRARE2 质粒,除了能够提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的

AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA 六个稀有密码子的 tRNA 外,还提供了第七个稀有密码子

CGG tRNA。Rosetta2 载体通过提供稀有密码子,使得该宿主菌相对于其他大肠杆菌,能够提供

更加通用的蛋白质表达,从而提升目的蛋白表达水平。同时,pRARE2 质粒具有氯霉素抗性。经

PUC18 质粒检测,感受态细胞的效率可达 108 cfu/μg DNA。

产品组成

组分

CC96143-01

CC96143-02

CC96143-03

Rosetta 2 感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型:F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm pRARE2 (CamR)

LBA4404化转根癌农杆菌感受态

存储条件

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

pRARE2 外,无外源质粒 DNA 残留;

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;

4. 向离心管中加入 900μL LB SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

LBA4404化转根癌农杆菌感受态

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保.高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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Rosetta 2 来源于 Rosetta,本菌株含有 pRARE2 质粒,除了能够提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的

AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA 六个稀有密码子的 tRNA 外,还提供了第七个稀有密码子

CGG tRNA。Rosetta2 载体通过提供稀有密码子,使得该宿主菌相对于其他大肠杆菌,能够提供

更加通用的蛋白质表达,从而提升目的蛋白表达水平。同时,pRARE2 质粒具有氯霉素抗性。经

PUC18 质粒检测,感受态细胞的效率可达 108 cfu/μg DNA。

产品组成

组分

CC96143-01

CC96143-02

CC96143-03

Rosetta 2 感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型:F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm pRARE2 (CamR)

存储条件

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

pRARE2 外,无外源质粒 DNA 残留;

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;

4. 向离心管中加入 900μL LB SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保.高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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