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Rosetta (DE3)pLacl化转表达感受态

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更新时间:2023-04-26 19:24:53浏览次数:635

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产品简介

供货周期 现货 应用领域 生物产业
Rosetta (DE3)pLacl化转表达感受态
菌株来源于 JM109,用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7 启动子的表达载体(如 pET 系 列)的基因。λ 噬菌体 DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶,该区整合于 JM109 的染色体上,所以称为 JM109(DE3)??赏北泶?T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX,
pMAL

详细介绍

Rosetta (DE3)pLacl化转表达感受态

产品简介 JM109(DE3)菌株来源于 JM109,用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7 启动子的表达载体(pET )的基因。λ 噬菌体 DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶,该区整合于 JM109 的染色体上,所以称 JM109(DE3)。可同时表达 T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX, pMAL 等质粒的蛋白表达。JM109(DE3)菌株不可用于蓝白斑筛选试验。经 pUC18 质粒转化检测, JM109(DE3)感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA。 存储条件 -80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 质量控制 pRARE 外,无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。 使用方法 1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min; 3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min; 4. 向离心管中加入 900 μL LB SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

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注意事项 1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用; 2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10; 3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 4. 为确保.高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。产品简介 JM109(DE3)菌株来源于 JM109,用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7 启动子的表达载体(pET )的基因。λ 噬菌体 DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶,该区整合于 JM109 的染色体上,所以称 JM109(DE3)。可同时表达 T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEXpMAL 等质粒的蛋白表达。JM109(DE3)菌株不可用于蓝白斑筛选试验。经 pUC18 质粒转化检测, JM109(DE3)感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA。  存储条件 -80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 质量控制 pRARE 外,无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA使用方法 1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min; 3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min; 4. 向离心管中加入 900 μL LB SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min; 5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。 注意事项 1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;

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2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/103. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 4. 为确保.高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。产品简介 JM109(DE3)菌株来源于 JM109,用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7 启动子的表达载体(pET )的基因。λ 噬菌体 DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶,该区整合于 JM109 的染色体上,所以称 JM109(DE3)??赏北泶?T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX, pMAL 等质粒的蛋白表达。JM109(DE3)菌株不可用于蓝白斑筛选试验。经 pUC18 质粒转化检测, JM109(DE3)感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA。  存储条件 -80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 质量控制 pRARE 外,无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。 使用方法 1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min; 3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min; 4. 向离心管中加入 900 μL LB SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min; 5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。 注意事项 1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用; 2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10; 3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 4. 为确保.高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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