化工仪器网
详细介绍
商品属性：
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
心脏 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X8142 |
细胞简介：
兔心脏微血管内皮分离自心脏组织；心脏是脊椎动物身体中最重要的一个器官，主要功能是为血液流动提供压力，把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成，左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开，故互不相通，心房与心室之间有瓣膜（房室瓣），这些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动，向器官、组织提供充足的血流量，以供应氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物（如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等），使细胞维持正常的代谢和功能。心脏微血管内皮细胞是组成心脏微血管腔面单层扁平上皮样细胞，它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在心脏血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。近年来大量研究表明，心肌微血管内皮细胞的功能和病理改变直接影响心肌细胞功能，也是诸多毒素、炎症因子及病毒等重要靶位，其作为体外研究的细胞模型在心肌缺血-再灌注发病机制和细胞间旁分泌细胞生长因子研究中起着重要作用。
原代细胞的培养条件：
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；
2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；
6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂??；
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞；
2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；
4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介：
实验室分离的兔心脏微血管内皮采用胶原酶-混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
实验室分离的兔心脏微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
包被条件：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基：含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：内皮细胞样
传代特性：可传2-3代
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔心脏微血管内皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存：
| 细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
| 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种：
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
?、?消化培养法
?、?悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品：
小鼠α半乳糖基抗体(Gal)试剂盒 96T/48T
小鼠αN已?；咸擒彰?span>(αNAG)试剂盒 96T/48T
小鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)试剂盒 96T/48T
小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)试剂盒 96T/48T
小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human adrenergic receptor a1A (ADRA1A) ELISA Kit 人能a1A受体(ADRA1A)试剂盒
humanProstaglandinF,PG-FELISAKit 人前列腺素F(PGF)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanai-perinuclearfactor,APF试剂盒人抗核周因子抗体(APF)试剂盒规格：96T/48T
植物细胞可溶性总蛋白制备试剂盒20次
Humayrosinehydroxylase,THELISAKit人酪羟化酶(TH)试剂盒规格：96T/48T
BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体
软骨肉瘤相关蛋白2抗体
TIMD4重组小鼠 TIM4 / TIMD4 蛋白 Protein
Caspase-6 (CT 0.5mgCaspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)
FAM3B重组人 FAM3B 蛋白 (Fc 标签) Protein
FABP3 Protein Human 重组人 FABP3 / H-FABP / M-FABP 蛋白
CSF1R Protein Rat 重组大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白
Caspase-6 (CT 0.5mgCaspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)
FABP3 Protein Human 重组人 FABP3 / H-FABP / M-FABP 蛋白
TIMD4重组小鼠 TIM4 / TIMD4 蛋白 Protein
CSF1R Protein Rat 重组大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白
FAM3B重组人 FAM3B 蛋白 (Fc 标签) Protein
兔心脏微血管内皮细胞大鼠基质金属蛋白酶2(MMP2)试剂盒 ，英文名： MMP2 ELISA Kit
Mouse histamine (HIS) ELISA Kit 小鼠组胺(HIS)试剂盒
RatBladdeumoraigen,BTAELISAKit 大鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFAELISAKit大鼠
细胞胶原蛋白(collagen)比色法定量试剂盒20次
Ratmyeloperoxidase,MPOELISAKit大鼠髓过氧化物酶(MPO)试剂盒规格：96T/48T
化工仪器网