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详细介绍
商品属性：
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
小肠 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7984 |
细胞简介：
兔小肠隐窝上皮分离自小肠组织；小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程，同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞，粘膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺，其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短，不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能，其中以吸收和分泌功能为主。小肠腔面的环行皱襞从幽门附近开始出现，在十二指肠末段和空肠头段极发达，向下逐渐减少和变矮，至肠中段以下基本消失。粘膜表面还有许多细小的肠绒毛，是由上皮和固有层向肠腔突起而成，形状不一，以十二指肠和空肠头段达。绒毛于十二指肠呈叶状，于空肠呈指状，于回肠则细而短。环行皱襞和绒毛使小肠表面积扩大20-30倍，绒毛根部的上皮下隐至固有层形成管状的小肠腺，又称肠隐窝，故小肠腺与绒毛的上皮是连续的，小肠腺直接开口于肠腔。
方法简介：
实验室分离的兔小肠隐窝上皮采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
实验室分离的兔小肠隐窝上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：上皮细胞样
传代特性：可传1-2代
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔小肠隐窝上皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存：
| 细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
| 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种：
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
?、?消化培养法
?、?悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
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器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品：
小鼠趋化因子(mouse RAES) 作用： ELISA 规格： 进口分装
小鼠抵抗素(mouse Resistin) 作用： ELISA 规格： 进口分装
小鼠可溶性破骨细胞异化因子(mouse sRANKL) 作用： ELISA 规格： 进口分装
小鼠血清淀粉样蛋白(mouse SAA) 作用： ELISA 规格： 进口分装
小鼠神经营养因子3(-3)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human immunoglobulin heavy chain (IgH) ELISA Kit 重链(IgH)试剂盒
HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)试剂盒 96T/48T 进口分装
Fishi-iodothyronine,T3试剂盒鱼类三甲状腺原(T3)试剂盒规格：96T/48T
真菌/酵母非蛋白/游离巯基含量比色法定量试剂盒20次
MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISAKit小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)试剂盒规格：96T/48T
ARCH抗体
溶质载体家族蛋白20成员A1抗体
NA重组甲型流感 H3N2 神经酶 (Neuraminidase / NA) (E119V mutation) (高活性) Protein
PSCA 前列腺干细胞抗原 0.5mgPSCA 前列腺干细胞抗原
NOG重组人 Noggin / NOG 蛋白 Protein
COASY Protein Human 重组人 COASY / CoA synthase 蛋白
EPHB6 Protein Human 重组人 EphB6 / EphB6 蛋白 (Fc 标签)
PSCA 前列腺干细胞抗原 0.5mgPSCA 前列腺干细胞抗原
COASY Protein Human 重组人 COASY / CoA synthase 蛋白
NA重组甲型流感 H3N2 神经酶 (Neuraminidase / NA) (E119V mutation) (高活性) Protein
EPHB6 Protein Human 重组人 EphB6 / EphB6 蛋白 (Fc 标签)
NOG重组人 Noggin / NOG 蛋白 Protein
兔小肠隐窝上皮细胞大鼠基质金属蛋白酶9(MMP9)试剂盒 ，英文名： MMP9 ELISA Kit
Mouse ansforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒
Ratα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISAKit 大鼠αS转移酶(α-GST)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFAS/CD95ELISAKit大鼠凋亡相关因子
细胞甲戊二羟酸激酶(mevalonatekinase)活性比色法定量试剂盒20次
RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)试剂盒规格：96T/48T
原代细胞的培养条件：
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；
2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；
6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂?。?/p>
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞；
2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；
4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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