酶標(biāo)儀的檢測項(xiàng)目
酶標(biāo)儀與相應(yīng)試劑配合,適用于酶聯(lián)免疫(ELISA)檢測、微生物微孔板培養(yǎng)檢測、化學(xué)或生物化學(xué)微量分析法檢測等應(yīng)用比色法檢測的項(xiàng)目, 廣泛應(yīng)用于各級(jí)醫(yī)院臨床診斷、微生物學(xué)、免疫學(xué)、病理學(xué)、生物學(xué)、藥物學(xué)、畜牧及農(nóng)業(yè)科學(xué)等領(lǐng)域。
一 在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用;
酶標(biāo)儀在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用已有幾十年歷史,現(xiàn)已經(jīng)成為臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)的主要儀器設(shè)備。
1. 血源四項(xiàng):
衛(wèi)生部臨床輸血技術(shù)規(guī)范要求,為確保每位受血者安全,預(yù)防和杜絕因輸血后感染乙型肝炎(乙肝)、丙型肝炎(丙肝)、梅毒、艾滋病引起的醫(yī)療糾紛,要求受血者在輸注血液制品前均接受傳染病四項(xiàng)檢測。
2. 病毒、病菌感染疾病:
?。?)人類免疫缺陷病毒抗體(HIVⅠ/Ⅱ型)檢測;
?。?)乙肝病毒HBV(兩對(duì)半)檢測;
?。?)甲、丙、丁、戊、庚肝等病毒感染檢測;
?。?)梅毒螺旋體(TP)抗體;
?。?)乙型腦炎病毒抗體檢測;
?。?)肺炎衣原體抗體;
?。?)肺炎支原體抗體;
?。?)麻疹病毒抗體;
?。?)EB病毒;
?。?0)結(jié)核桿菌抗體等檢測。
3. TORCH檢測(優(yōu)生優(yōu)育產(chǎn)前檢查):
主要項(xiàng)目有:風(fēng)疹(RV)感染;巨細(xì)胞(CMV)感染;單純皰疹(HSV I、II型)感染和弓形體感染。TORCH綜合癥患者造成孕婦流產(chǎn)、死胎,出生后有嚴(yán)重的智力障礙,生活不能自理,給家庭及社會(huì)造成*大的精神及經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。我國每年約有26000個(gè)TORCH患兒出生,平均每小時(shí)就有3人,對(duì)優(yōu)生優(yōu)育與人口素質(zhì)構(gòu)成*大的威脅,因此它的感染診治工作引起普遍關(guān)注。
4. 唐氏兒(先天愚型)風(fēng)險(xiǎn)篩查:
用酶標(biāo)儀進(jìn)行以下項(xiàng)目檢測,再利用唐氏兒風(fēng)險(xiǎn)分析軟件,可以在產(chǎn)前對(duì)產(chǎn)生唐氏兒的風(fēng)險(xiǎn)做出判定,常檢測以下幾項(xiàng):
?。?)甲胎蛋白測定(AFP);
?。?)游離β絨毛膜促性腺激素(Free β-hCG)測定;
?。?)妊娠相關(guān)血漿蛋白(PAPP-A);
?。?)游離雌三醇
5. 甲狀腺(五項(xiàng))檢驗(yàn):
?。?)三碘甲腺原氨酸T3含量測定;
?。?)甲狀腺素T4含量測定;
?。?)促甲狀腺素TSH定量測定;
?。?)抗甲狀腺球蛋白抗體TG-Ab檢測;
(5)抗甲狀腺微粒體抗體TM-Ab檢;
6. 性激素(六項(xiàng))檢驗(yàn);
?。?)雌二醇EST(E2);
(2)睪酮TES;
(3)孕酮Pr;
?。?)卵泡刺激素FSH;
?。?)催乳素PRL;
?。?)黃體生成素LH;
7. 腫瘤標(biāo)志物檢測:
(1)甲胎蛋白AFP測定;
?。?)癌胚抗原CEA測定;
?。?)乳腺癌抗原CA15-3;
(4)胰腺癌抗原CA242;
?。?)胃腸癌抗原CA19-9;
?。?)卵巢癌;
?。?)抗原CA125;
?。?)前列腺特異抗原測定PSA;
?。?)β2微球蛋白測定β2-MG;
?。?0)人絨毛膜促性腺激素-β測定β-HCG。
另外還有:糖尿病檢測;過敏原檢測;自身免疫病檢測;心梗診斷;肝纖維化檢測;人類細(xì)胞因子檢測;血液學(xué)檢驗(yàn)等,此處不再一一列出。
二. 酶標(biāo)儀在食品安全檢測中的應(yīng)用
近年來,食品安全形勢越來越嚴(yán)峻,世界各國都很重視食品安全問題,先后制定了嚴(yán)格的監(jiān)管措施,加強(qiáng)了監(jiān)測力度。結(jié)合我國目前的實(shí)際,酶標(biāo)儀的應(yīng)用初步歸納了以下幾個(gè)方面:
1. 農(nóng)藥殘留檢測(酶抑制率法):可用于jia胺磷等有機(jī)磷和克bai威等氨基甲酸醋類農(nóng)藥在蔬菜中的殘毒快速檢測。
適用于葉菜類(除韭菜)、果菜類、豆菜類、瓜菜類、根菜類(除胡蘿卜、菱白等)中的農(nóng)藥殘毒快速檢測,屬于過篩檢測 (NY/T448-2001)。確認(rèn)檢測仍為色譜法。 ELISA法農(nóng)藥殘留試劑,國外已有商品試劑和出售,國內(nèi)還少見(檢測成本較高,每個(gè)檢測約80-100元) 。
2. 三聚氰胺檢測(ELISA):
三聚氰胺作為化工原料,不是食品添加劑,禁止人為添加到食品中。三聚氰胺檢測試劑盒是利用酶聯(lián)免疫吸附測定法(競爭法)進(jìn)行測定的,可用于食品及飼料中三聚氰胺的定量測定。
3. 激素及代謝產(chǎn)物檢測(獸藥殘留)
3.1 克倫特羅(Clenbuterol),俗稱瘦肉精,是一種β—xing奮劑。因其能改善脂肪型動(dòng)物的肉與脂肪的比例,并能加速動(dòng)物生長,而被廣泛添加于動(dòng)物飼料中,克倫特羅可以殘留在動(dòng)物的體內(nèi)。然而這種藥物對(duì)人有嚴(yán)重的副作用,輕則導(dǎo)致心跳及心律不正常,重則可引發(fā)心臟病。
3.2 萊克多巴胺(Ractopamine)屬于β-xing奮劑,β-xing奮劑是營養(yǎng)重分配劑一種,是一類結(jié)構(gòu)和功能類似腎上腺素和去甲腎上腺素的苯乙醇胺類衍生物,它可以加快畜禽生長速度,降低酮體脂肪含量,提高瘦肉率。
3.3 己烯雌酚是甾類同化激素,被大量用于促進(jìn)反芻動(dòng)物的生長。但由于己烯雌酚存在明顯的致癌性,歐美等發(fā)達(dá)國家已相繼禁止或嚴(yán)格禁止使用。
3.4 諾龍“19-去甲睪酮”(19-Nortestosterone)是雄性激素睪酮的衍生物,為一種蛋白質(zhì)同化類激素.有促進(jìn)蛋白質(zhì)合成,減少蛋白質(zhì)分解,刺激骨髓造血,加速骨生長等作用。有引起性功能紊亂,肝腎功能損害,甚至于誘發(fā)腫瘤等潛在危害。
4. 抗生素檢測(獸藥殘留)
4.1 氯霉素:為廣譜抗菌素,因有嚴(yán)重的毒副作用,氯霉素一般不用于輕度感染。主要用于傷寒、副傷寒和其他沙門氏菌屬感染。氯霉素由于有嚴(yán)重的致再生障礙性貧血的不良反應(yīng)(Varma,et al,1986)及少數(shù)可引起黃疸,原有肝臟疾病者甚至可引起急性肝壞死。許多國家已禁止氯霉素在動(dòng)物疾病防治上的使用,尤其是食品動(dòng)物。
4.2 鏈霉素:是一種從灰鏈霉菌的培養(yǎng)液中提取的抗菌素。屬于氨基糖甙堿性化合物,它與結(jié)核桿菌菌體核糖核酸蛋白體蛋白質(zhì)結(jié)合,起到了干擾結(jié)核桿菌蛋白質(zhì)合成的作用,從而殺滅或者抑制結(jié)核桿菌生長的作用。
4.3 青霉素:是抗菌素的一種,是指從青霉菌培養(yǎng)液中提制的分子中含有青霉烷、能破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁并在細(xì)菌細(xì)胞的繁殖期起殺菌作用的一類抗生素,是*一種能夠治療人類疾病的抗生素。 還有:四環(huán)素、慶大霉素、氟苯尼考 等。
4.4 磺胺類(三合一,五合一):適用于治療溶血性鏈球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌等感染疾病,藥效持久。用作飼料添加劑,用于防治葡萄球菌及溶血性鏈球菌等的感染,即主要治療禽霍亂、禽傷寒,雞球蟲病等。
4.5 硝基呋喃類(Nitrofurans)藥物是一種廣譜抗生素,因價(jià)格較低且效果好,而廣泛用于畜禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè),但由于硝基呋喃類藥物及其代謝物對(duì)人體有致癌、致畸胎副作用,1995年起歐盟禁止硝基呋喃類藥物在畜禽及水產(chǎn)動(dòng)物食品中使用,并嚴(yán)格執(zhí)行對(duì)水產(chǎn)中硝基呋喃的殘留檢測。
4.6 孔雀石綠是一種帶有金屬光澤的綠色結(jié)晶體,其既是殺真菌劑,又是染料。長期以來,漁民都用它來預(yù)防魚的水霉病、鰓霉病、小瓜蟲病等,而且為了使鱗受損的魚延長生命,在運(yùn)輸過程中和存放池內(nèi),也常使用孔雀石綠。研究顯示,孔雀石綠在魚內(nèi)殘留時(shí)間太長,且其具有高毒性、高殘留和致癌、致畸、致突變等副作用。
4.7 蘇丹hong色素:是一種常用的化學(xué)制劑。由于這種被當(dāng)成食用色素的染色劑,只會(huì)緩慢影響食用者的健康,并不會(huì)快速致病,因此隱蔽性很強(qiáng)。但長期食用含“蘇丹hong”食品的消費(fèi)者,對(duì)其身體造成的*突出危害可能會(huì)使肝部DNA結(jié)構(gòu)變化,導(dǎo)致肝部病癥。
4.8恩諾沙星是喹諾酮類抗菌藥,因其抗菌譜廣、高效、低毒、組織穿透力強(qiáng),已成為獸醫(yī)臨診和水產(chǎn)養(yǎng)殖中重要的抗感染藥物之一,被大量用于治療、預(yù)防和促進(jìn)生長。但由于其耐藥性和潛在的致癌性,歐盟、日本及我國均制定了在組織中的*高殘留*為100ppb。
5. 霉菌毒素檢測主要有:
(1)黃qu霉毒素 B1;
(2)黃qu霉毒素 M1;
?。?)黃qu霉毒素總量 ( B1、B2、G1、G2、M1、M2);
?。?)伏馬菌毒素;
?。?)赭曲霉毒素 A;
?。?)玉米赤霉烯酮;
(7)脫氧雪腐鐮刀菌烯醇;
?。?)T-2毒素等。
三. 動(dòng)物疾病檢測
豬弓形體IgG抗體檢測:
?。?)豬口蹄疫ELISA診斷試劑盒用于檢測O型口蹄疫病毒抗體。
(2)豬藍(lán)耳病ELISA診斷試劑盒用于檢測豬藍(lán)耳病病毒抗體。
?。?)豬偽狂犬病ELISA抗體檢測診斷試劑盒用于偽狂犬病毒抗體。
?。?)豬瘟ELISA診斷試劑盒用于檢測豬瘟抗體。
?。?)豬細(xì)小病毒ELISA診斷試劑盒用于檢測細(xì)小病毒抗體。
?。?)馬傳染性貧血ELISA Kit檢測抗體;牛病毒性腹瀉抗體ELISA Kit檢測抗體;
?。?)牛病毒性腹瀉抗原ELISA Kit檢測抗體;牛傳染性鼻氣管炎ELISA 檢測抗體;
(8)牛副結(jié)核ELISA Kit檢測抗體;??谔阋叻墙Y(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA Kit檢測抗體
?。?)犬傳染性肝炎ELISA Kit檢測抗體;犬瘟熱ELISA Kit檢測抗體;
?。?0)犬細(xì)小病毒ELISA Kit檢測抗體;豬布魯氏桿菌病ELISA Kit檢測抗體;
(11)豬傳染性胃腸炎ELISA Kit檢測抗體;豬喘氣病ELISA Kit檢測抗體;
四. 禽病類檢測:
?。?)禽流感H5N1抗體ELISA診斷試劑盒用于檢測雞血清中的禽流感病毒抗體。評(píng)估雞場禽流感疫苗免疫狀況。又如:
(2)新城疫ELISA試劑盒(NDV-Ab) 檢測抗體 ;
(3)傳染性法氏囊ELISA試劑盒(IBD-Ab) 檢測抗體 ;
?。?)傳染性支氣管炎ELISA試劑盒 (IBV-Ab);
?。?)病毒性關(guān)節(jié)炎ELISA試劑盒 (REO-Ab);
(6)禽鼻氣管炎ELISA試劑盒 (ART-Ab);
(7)減蛋綜合癥ELISA試劑盒 (EDS-Ab);
?。?)敗血支原體ELISA試劑盒 (MG-Ab) 檢測抗體 ;
?。?)滑液支原體快速診斷試劑盒(MS-Ab) 檢測抗體;
?。?0)火雞支原體ELISA試劑盒 (MM-Ab)檢測抗體;
(11)腸炎沙門氏菌ELISA試劑盒(SE-Ab);
(12)鼠傷寒沙門氏菌ELISA試劑盒 (ST-Ab) 檢測抗體;
(13)鼻氣管炎鳥桿菌ELISA試劑盒(ORT-Ab) ;
?。?4)鴨腸炎沙門氏菌ELISA試劑盒(SE-Ab) 檢測抗體 ;
?。?5)鴨鼠傷寒沙門氏菌ELISA試劑盒 (ST-Ab) 檢測抗體 ;
?。?6)雞傳染性貧血ELISA試劑盒(CAV-Ab) 檢測抗體 。