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二手安捷倫1200液相色譜儀基本原理 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?ensp; 1. 了解高效液相色譜法分離的基本原理； 2. 了解高效液相色譜儀的基本構(gòu)造； 3. 了解高效液相色譜儀的基本操作。
二、基本原理 高效液相色譜（HPLC）法是以高壓下的液體為流動(dòng)相，并采用顆粒極細(xì)的高效固定相的柱色譜分離技術(shù)。高效液相色譜對(duì)樣品的適用性廣，不受分析對(duì)象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。
二手安捷倫1200液相色譜儀分析原理： （一）高效液相色譜分析的流程：由泵將儲(chǔ)液瓶中的溶劑吸入色譜系統(tǒng)，然后輸出，經(jīng)流量與壓力測(cè)量之后，導(dǎo)入進(jìn)樣器。被測(cè)物由進(jìn)樣器注入，并隨流動(dòng)相通過色譜柱，在柱上進(jìn)行分離后進(jìn)入檢測(cè)器，檢測(cè)信號(hào)由數(shù)據(jù)處理設(shè)備采集與處理，并記錄色譜圖。廢液流入廢液瓶。遇到復(fù)雜的混合物分離（極性范圍比較寬）還可用梯度控制器作梯度洗脫。 （二）高效液相色譜的分離過程：同其他色譜過程一樣，HPLC也是溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間進(jìn)行的一種連續(xù)多次交換過程。它借溶質(zhì)在兩相間分配系數(shù)、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質(zhì)得以分離。
開始樣品加在柱頭上，假設(shè)樣品中含有３個(gè)組分，Ａ、Ｂ和Ｃ，隨流動(dòng)相一起進(jìn)入色譜柱，開始在固定相和流動(dòng)相之間進(jìn)行分配。分配系數(shù)小的組分Ａ不易被固定相阻留，較早地流出色譜柱。分配系數(shù)大的組分Ｃ在固定相上滯留時(shí)間長(zhǎng)，較晚流出色譜柱。組分Ｂ的分配系數(shù)介于Ａ，Ｃ之間，第二個(gè)流出色譜柱。若一個(gè)含有多個(gè)組分的混合物進(jìn)入系統(tǒng)，則混合物中各組分按其在兩相間分配系數(shù)的不同先后流出色譜柱，達(dá)到分離之目的。
不同組分在色譜過程中的分離情況，首先取決于各組分在兩相間的分配系數(shù)、吸附能力、親和力等是否有差異，這是熱力學(xué)平衡問題，也是分離的首要條件。其次，當(dāng)不同組分在色譜柱中運(yùn)動(dòng)時(shí)，譜帶隨柱長(zhǎng)展寬，分離情況與兩相之間的擴(kuò)散系數(shù)、固定相粒度的大小、柱的填充情況以及流動(dòng)相的流速等有關(guān)。所以分離終效果則是熱力學(xué)與動(dòng)力學(xué)兩方面的綜合效益。
三、系統(tǒng)構(gòu)成 1.主機(jī)：Waters Allance 2695高效液相色譜儀,分為①分離單元Allance2695；②紫外－可見檢測(cè)器2487；③熒光檢測(cè)器2474；④示差折光檢測(cè)器2414。 2.操作控制系統(tǒng)：DELL Dimmsen 4550微機(jī)；Waters Millunnium32 V4.0 色譜管理器軟件。
