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細(xì)胞破碎機(jī)的冷凍研磨技術(shù)講解
閱讀：600 發(fā)布時間：2020-12-12
細(xì)胞破碎機(jī)即在樣品容器中放入研磨珠，利用容器的高速自轉(zhuǎn)和震動，帶動研磨珠劇烈運動，對樣品進(jìn)行研磨粉碎，從而達(dá)到破碎細(xì)胞壁，或者將固體顆粒處理為粉末的目的。
細(xì)胞破碎有關(guān)冷凍研磨技術(shù)的說明：
細(xì)胞破碎分離提純某一種蛋白質(zhì)時，首先要把蛋白質(zhì)從組織或細(xì)胞中釋放出來并保持原來的天然狀態(tài)，不喪失活性。所以要采用適當(dāng)?shù)姆椒▽⒔M織和細(xì)胞破碎。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織，其細(xì)胞破碎的難易不一，使用的方法也不相同，如動物臟器的細(xì)胞膜較脆弱，容易破碎，植物和微生物由于具有較堅固的纖維素、半纖維素組成的細(xì)胞壁。幾乎所有細(xì)菌的細(xì)胞壁都是由肽聚糖組成，它是難溶性的聚糖鏈，借助短肽交聯(lián)而成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，包圍在細(xì)胞周圍，使細(xì)胞具有一定的形狀和強(qiáng)度。破碎細(xì)菌的主要阻力是來自于肽聚糖的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，其網(wǎng)結(jié)構(gòu)的致密程度和強(qiáng)度取決于聚糖鏈上所存在的肽鍵的數(shù)量和其交聯(lián)的程度。
細(xì)胞放在低溫下冷凍（約-15℃℃），然后在室溫中融化，反覆多次而達(dá)到破壁作用。
細(xì)胞破碎冷凍研磨的原理由于冷凍，一方面能使細(xì)胞膜的疏水鍵結(jié)構(gòu)破裂，從而增加細(xì)胞的親水性能，另一方面胞內(nèi)水結(jié)晶，形成冰晶粒，引起細(xì)胞膨脹而破裂。對于細(xì)胞壁較脆弱的菌體，可采用此法。