详细介绍
产品名称 | |
英文名称 | Perkinsus olseni |
货号 | CP934591 |
产品特征:
奥尔森派琴虫探针法荧光定量PCR检测试剂盒灵敏度高:能对低拷贝或多样性模板进行定量。
特异性强:采用热启动酶的激活机制,抑制非特异性扩增 。
重复性好:扩增曲线重合度高,受干扰影响少。
扩增效率高:扩增曲线Ct值低,起峰快,效率高。
原理:
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。产品仅用于科研
检测方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加*同步。
定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法:
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成*同步。荧光定量PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;煸群?,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
以下是奥尔森派琴虫探针法荧光定量PCR检测试剂盒的相关产品:
小鼠补体片断5a(C5a)ELISA试盒
小鼠补体片断3a(C3a)ELISA试盒
2,3-苯并蒽小鼠补体蛋白5(C5)ELISA试盒
2-基蒽小鼠补体蛋白4(C4)ELISA试盒
4,5,7,4',5',7'-六羟基-2,2'-二基萘并二蒽小鼠补体蛋白3(C3)ELISA试盒
9,10-二苯基蒽小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)ELISA试盒
9,10-二-9-氧蒽小鼠波形蛋白(VIM)ELISA试盒
9,10-二蒽小鼠型肝炎抗体(IgG)ELISA试盒
9-羧基蒽小鼠酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试盒
苯并[a]蒽小鼠酮酸激酶(PK)ELISA试盒
苯并[k]荧蒽小鼠二酰辅酶A脱羧酶,线粒体(MLYCD)ELISA试盒
蒽小鼠二酸单酰辅酶A(malonyl CoA) ELISA试盒
玫红对氮蒽小鼠二(MDA)ELISA试盒
荧蒽小鼠氨酸转氨酶/谷转氨酶(ALT/GPT)ELISA试盒
苊小鼠表皮生长因子受体(EGFR)ELISA试盒布洛芬杂质J Ibuprofen impurity J65813-55-020mg,仅供布洛芬有关物质检查用
奥尔森派琴虫探针法荧光定量PCR检测试剂盒布洛芬杂质J Ibuprofen impurity J65813-55-020mg,仅供布洛芬有关物质检查用
布洛芬杂质F Ibuprofen impurity F65322-85-220mg,有关物质检查
布洛芬杂质F Ibuprofen impurity F65322-85-220mg,有关物质检查
布洛芬杂质A Ibuprofen impurity A66622-47-7100ul,检查
布洛芬杂质A Ibuprofen impurity A66622-47-7100ul,检查
不锈钢316屑状,100g/瓶
补骨脂异黄酮 Corylin53947-92-520mg/支,鉴别
补骨脂异黄酮 Corylin53947-92-520mg/支,鉴别
补骨脂二黄酮 Bavachin19879-32-430mg/支,供HPLC法含量测定用
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
具有下列特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。产品仅用于科研