详细介绍
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
具有下列特点:
1.产品仅用于科研即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
产品名称 | |
英文名称 | Alcaligenes faecalis |
货号 | CP933882 |
产品特征:
粪产碱杆菌探针法荧光定量PCR检测试剂盒灵敏度高:能对低拷贝或多样性模板进行定量。
特异性强:采用热启动酶的激活机制,抑制非特异性扩增 。
重复性好:扩增曲线重合度高,受干扰影响少。
扩增效率高:扩增曲线Ct值低,起峰快,效率高。
原理:
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
检测方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加*同步。
定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法:
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,产品仅用于科研使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成*同步。
荧光定量PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
以下是粪产碱杆菌探针法荧光定量PCR检测试剂盒的相关产品:
考来烯胺树脂标准品大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA Kit,48T/96T
胆酸标准品人胶原酶I(Collagenase I)ELISA Kit,48T/96T
重酒石酸胆碱标准品小鼠胶原酶I(Collagenase I)ELISA Kit,48T/96T
化胆碱标准品猴子胶原酶I(Collagenase I)ELISA Kit,48T/96T
过硫头孢尼西钠标准品大鼠胶原酶I(Collagenase I)ELISA Kit,48T/96T
吡啶酸铬标准品兔子胶原酶I(Collagenase I)ELISA Kit,48T/96T
糜蛋白酶标准品人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA Kit,48T/96T
环吡酮标准品大鼠髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA Kit,48T/96T
环吡酮相关物质A标准品人窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA Kit,48T/96T
环砒酮胺标准品大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA Kit,48T/96T
环吡酮相关物质B标准品人胶原酶II(Collagenase II)ELISA Kit,48T/96T
西司他铵标准品小鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA Kit,48T/96T
西咪替标准品大鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA Kit,48T/96T
盐酸西咪替标准品兔子胶原酶II(Collagenase II)ELISA Kit,48T/96T
粪产碱杆菌探针法荧光定量PCR检测试剂盒西诺沙星标准品豚鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA Kit,48T/96T GNAT3 G蛋白转录因子α3抗体川续断皂苷Ⅵ
GNAQ/Gα q G蛋白α亚单位蛋白Q抗体牡荆苷
Coconut lethal yellowing phytoplasma椰子致死黄化植原体PCR试剂盒
Coconut Tinangaja Viroid(CTiVd)椰子败生类病毒RT-PCR试剂盒
Colletotrichum kahawae咖啡浆果炭疽病菌PCR试剂盒
Cotton Leaf Crumple Virus(CLCrV)棉花皱叶病毒PCR试剂盒
Cotton Leaf Curl Virus(CLCuV)棉花曲叶病毒PCR试剂盒
Cowpea Mild Mottle Virus(CPMMV)豇豆轻斑病毒RT-PCR试剂盒
Cowpea Severe Mosaic Virus(CPSMV)豇豆重花叶病毒RT-PCR试剂盒
Crinipellis perniciosa可可丛枝病菌PCR试剂盒
Cronartium coleosporioides油松疱锈病菌PCR试剂盒
Cronartium comandrae北美松疱锈病菌PCR试剂盒
Cronartium conigenum松球果锈病菌PCR试剂盒
Cronartium fusiforme松纺锤瘤锈病菌PCR试剂盒
Cronartium ribicola松疱锈病菌PCR试剂盒
Cryphonectria cubensis桉树溃疡病菌PCR试剂盒
Cucumber Green Mottle Mosaic Virus(CGMMV)黄瓜绿斑驳花叶病毒RT-PCR试剂盒
Cucumber Mosaic Virus(CMV)黄瓜花叶病毒RT-PCR试剂盒
Cucurbit Yellow Stunting Disorder V(CYSDV)葫芦黄色矮化失调病毒PCR试剂盒
Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens菜豆细菌性萎蔫病菌PCR试剂盒
Curtobacterium flaccumfaciens pv. oortii郁金香黄色疱斑病菌PCR试剂盒
Cylindrocladium parasiticum花生黑腐病菌PCR试剂盒
Cymbidium Mosaic Virus(CymMV)兰花花叶病毒RT-PCR试剂盒
Cymbidium Ringspot Virus(CymRSV)兰花环斑病毒PCR试剂盒
Diaporthe helianthi向日葵茎溃疡病菌PCR试剂盒
Diaporthe perniciosa苹果果腐病菌PCR试剂盒
Diaporthe phaseolorum大豆茎溃疡病菌PCR试剂盒
GMCL1L 生殖细胞样蛋白1样蛋白抗体芒柄花素
GM130 高尔基体自身蛋白GM130抗体(-)-薄荷酮
GM1(GS) 神经节苷酯抗体胡薄荷酮
GlyR alpha 1/2/3 甘氨酸受体alpha 1/2/3型抗体1,5-O-二咖???/span>
Glypican 6 脂?;嫉鞍拙厶?6抗体3,29-二苯?;槁ト嗜?/span>