详细介绍
产品名称 | |
英文名称 | Acinetobacter lwoffi |
货号 | CP933849 |
产品特征:
鲁氏不动杆菌探针法荧光定量PCR检测试剂盒灵敏度高:能对低拷贝或多样性模板进行定量。
特异性强:采用热启动酶的激活机制,抑制非特异性扩增 。
重复性好:扩增曲线重合度高,受干扰影响少。
扩增效率高:扩增曲线Ct值低,起峰快,效率高。
原理:
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。产品仅用于科研
检测方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加*同步。
定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法:
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成*同步。荧光定量PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
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己烯雌酚快速检测卡人糖蛋白130(gp130)ELISA Kit,48T/96T
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粮食农药速测卡
鲁氏不动杆菌探针法荧光定量PCR检测试剂盒大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA Kit,48T/96T
蔬菜农药检测卡兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA Kit,48T/96T Histone H3 (tri methyl K36) 三基化组蛋白H3抗体柴胡皂苷C
Histone H3 (mono methyl K79) 单基组蛋白H3K9抗体柴胡皂苷D
Histone H3 (Di Methyl K9) 二基化组蛋白H3K9抗体柴胡皂苷B1
Histone H3 (Di Methyl K4) 二基化组蛋白H3K4抗体柴胡皂苷B2
Histone H3 (Di Methyl K36) 二基化组蛋白H3抗体土贝母苷
Histone H3 (Di Methyl K27) 三基化组蛋白H3抗体牛蒡子苷
Histone H3 组蛋白H3抗体靛蓝
Histone H2B 组蛋白H2B抗体黄柏酮
Histone H2A.Z/ H2AFZ 组蛋白H2AZ抗体吴茱萸碱
Histone H2A.x 组蛋白H2AX抗体吴茱萸次碱
Histone H2A 组蛋白H2A抗体松脂醇二葡萄糖苷
Histone H1 组蛋白H1抗体2,3,5,4-四羟基二苯烯葡萄糖苷
HIST1H2AH 组蛋白H2A/S抗体贝母素
His tag(CT) 聚组氨酸抗体g标签抗体(C端)贝母素
His tag(2D5) 小鼠抗聚组氨酸单克隆抗体连翘苷
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
具有下列特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。产品仅用于科研