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細胞增殖是生物體的重要生命特征,細胞以分裂的方式進行增殖。單細胞生物,以細胞分裂的方式產(chǎn)生新的個體。多細胞生物,以細胞分裂的方式產(chǎn)生新的細胞,用來補充體內(nèi)衰老或死亡的細胞。
CCK-8常應用于檢測細胞的增殖能力。CCK-8試劑中含有WST–8:化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪*(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產(chǎn)物(Formazan)。生成的甲臜物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比,用酶標儀在450nm波長處測定其吸光度值(OD值)來判斷活細胞數(shù)量,OD值越大,細胞活性越強(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。
該方法已被廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞增殖試驗、細胞毒性試驗以及藥敏試驗等。其優(yōu)點包括靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好,操作簡便,省時省力,水溶性,不需要換液,對細胞毒性低等。
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