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當(dāng)前位置:> 供求商機(jī)> 細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)服務(wù)
一、技術(shù)簡介
細(xì)胞黏附主要用于判定細(xì)胞在經(jīng)過各種藥物處理、基因轉(zhuǎn)染、敲除或培養(yǎng)條件改變后,細(xì)胞的黏附能力改變情況。通??煞譃閮深?,即細(xì)胞與細(xì)胞黏附和細(xì)胞與基質(zhì)黏附。細(xì)胞黏附性的改變在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中也發(fā)揮著重要作用。惡性腫瘤具有從原發(fā)瘤分離及在體內(nèi)擴(kuò)散的能力,提示這些細(xì)胞在相互識別及黏附機(jī)制方面發(fā)生了改變。
二、實(shí)驗(yàn)流程
1. 用無血清培養(yǎng)基RPMI-1640將Matrigel(人工基底膜膠)配制成0.04μg/μl的人工基底膜膠備用,96孔板每孔中鋪Matrigel 2μg,放于超凈臺中風(fēng)干過夜。
2. 在96孔板加入適量無血清RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)液(或PBS或生理鹽水),放置60-90分鐘。3. 洗去多余的膠,取培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞以1×104/孔接種在鋪膠的96孔板中,設(shè)3個重復(fù)孔,放入37攝氏度5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。
4. 加藥和模型藥,培養(yǎng)48h。
5. MTT檢測:吸掉液體,然后每孔加入MTT 10μl,繼續(xù)培養(yǎng)4h,吸掉液體,每孔加入二甲基亞砜(DMSO)100μl,在振蕩器上振蕩5-10分鐘,在顯微鏡下觀察無晶體,然后在酶標(biāo)儀490nm波長讀取數(shù)值。
三、服務(wù)說明及結(jié)果
1. 客戶提供:藥物。
2. 公司提供:基本實(shí)驗(yàn)步驟、細(xì)胞粘附圖片、MTT檢測結(jié)果。
3. 實(shí)驗(yàn)周期:10個工作日。
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