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雨蛙素诱导小鼠慢性胰腺炎动物模型
雨蛙素诱导小鼠慢性胰腺炎动物模型:
?品系与性别?:C57BL/6雄性小鼠(8-10周龄,体重20-25g),部分研究使用PRSS1转基因小鼠增强人类慢性胰腺炎(CP)相似性
。
?饲养条件?:SPF级环境,实验前禁食12小时(自由饮水)
。
?母液配制?
溶解1 mg雨蛙素于1 mL生理盐水,配成1 mg/mL母液,过滤除菌后分装冻存
。
?工作液浓度?
使用前稀释至5-10 μg/mL(生理盐水),常用注射剂量50 μg/kg。
?给药方案?
?基础方案?:每周3次腹腔注射(50 μg/kg),持续6-7周
。
?强化方案?:联合LPS(10-15 mg/kg)加重纤维化,末次雨蛙素注射后追加LPS
。
?急性转慢性?:通过多次急性诱导(如每周多次雨蛙素注射)模拟慢性病程
。
?病理学观察?
?HE染色?:腺泡细胞变小、炎性细胞浸润、间质纤维化。
?胶原沉积?:ku味酸-天狼星红染色定量纤维化程度
。
?免疫组化?:检测α-SMA表达,反映胰腺星状细胞活化
。
?生化指标?
血清定粉酶、脂肪酶水平
。
炎症因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)检测
。
?分子机制分析?
Western blot检测NF-κB/p65、IL-6等通路蛋白
。
qPCR分析纤维化相关基因(如Smad3)
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