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中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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動(dòng)物模型構(gòu)建之DSS潰瘍性結(jié)腸炎模型

時(shí)間:2021/3/5閱讀:3910
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本實(shí)驗(yàn)?zāi)P褪褂眯∈?、大鼠、兔等?dòng)物均可造模,通過給予動(dòng)物自由飲用不同濃度的DSS(MW:36000~50000)水溶液,根據(jù)用藥時(shí)間及用藥周期可制成急性和慢性兩種結(jié)腸炎模型。該模型癥狀表現(xiàn)與人類UC極為相似,主要表現(xiàn)為腹瀉、黏液樣便、糞便潛血、肉眼血便、重量減輕、活動(dòng)度減少,毛色變差等。

 

一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:C57BL/6或BALB/c,雌性,6-8周。每組至少8-10只小鼠。

 2.造模試劑:DSS,Mw 36000-50000,含硫量17-20%。

 3.DSS濃度:急性期模型通常為3-5%,慢性期模型通常為1-3%;可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求及動(dòng)物類型摸索濃度。該濃度為質(zhì)量體積比,使用飲用水配置后,過濾除菌。

 

二、模型構(gòu)建

  慢性與急性結(jié)腸炎模型的構(gòu)建時(shí)間分別為:8天與50天,使用DSS濃度為3-5%和1-3%,之后脫頸,取腸道組織,進(jìn)行相應(yīng)病理染色。

 

三、如何評(píng)價(jià)造模是否成功

  1)疾病活躍指數(shù)評(píng)分 

從三個(gè)方面進(jìn)行評(píng)估打分,分別為體重、糞便粘稠度、糞便潛血等指標(biāo)。

  2)組織學(xué)變化評(píng)分:

 a)潰瘍形成個(gè)數(shù);

 b)上皮細(xì)胞變化;

 c)炎癥浸潤;

 d)淋巴結(jié)形成;

組織學(xué)分析的標(biāo)準(zhǔn)方法為HE染色。

  3)結(jié)腸長(zhǎng)度:

急性結(jié)腸炎模型中,第8天可檢測(cè)到結(jié)腸長(zhǎng)度縮短;慢性結(jié)腸炎模型中,結(jié)腸長(zhǎng)度縮短更加明顯。

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