低聚半乳糖(GOS)是一种常见的功能性低聚糖，可作为益生元添加到食品中，也可以作为保健品使用。目前低聚半乳糖的新国标GB5009.289-2023《食品中低聚半乳糖的测定》开始正式实施。

由于低聚半乳糖没有紫外吸收基团，一般检测方法是使用通用性检测器，但灵敏度较差，因此?；嵫≡穸阅勘晡锝醒苌蠹觳?。2-氨基苯甲酰胺因为具有较强的荧光信号，被广泛的应用于还原性糖衍生检测。在色谱分析中对于糖类的检测主要差异是亲水作用力，所以常选择亲水模式进行分离。基于以上原理，GB5009.289-2023采用2-氨基苯甲酰胺作为衍生剂，使用高效液相色谱法进行检测。

参照GB5009.289-2023要求，使用S6000高效液相色谱搭配和曦科技Morphling HILIC-Amide色谱柱进行食品中低聚半乳糖的测定，

分析条件

仪器：S6000 FL

色谱柱：和曦科技Morphling HILIC-Amide, 4.6 × 150 mm, 5 μm, 100 ?

流动相：A：甲酸铵溶液，B：乙腈

柱温：30 ℃

激发波长：355 nm

发射波长：430 nm

流速：1.0 mL/min

进样量：20 μL

实验结果

前处理方法

称取1.0 g试样，用水定容至50 mL并混匀，作为试样液。

吸取20 μL试样液，加入200 μL 2-氨基苯甲酰胺衍生溶液，涡旋混匀，在60 ℃水浴中保温120 min，放至室温后，加入1 mL乙酸铵溶液（0.2 mol/L，pH=4.50）涡旋混合。移取0.5 mL混合溶液，加入200 μL淀粉葡糖甘酶溶液（180 U/mL），50 ℃水浴保温30 min。放至室温后，加入0.7 mL乙腈，混匀后6000 r/min离心5 min，上清液用0.22 μm有机滤膜过滤后，待测。

使用同样方法对标准品进行衍生后，待测。

标准品检测

采用上述液相方法，对混合标准品进行衍生化后上机检测。结果如下图所示，结果表明，7种化合物峰形较好，分离度满足要求。

图1  7种标准溶液衍生物色谱图

（A：空白溶液；B：混合标准品溶液）

1 麦芽糖衍生物、2 乳糖衍生物、3 麦芽三糖衍生物、4 麦芽四糖衍生物、5 麦芽五糖衍生物、6 麦芽六糖衍生物、7 麦芽七糖衍生物）

结论

采用S6000高效液相色谱仪搭配和曦科技Morphling HILIC-Amide（ 4.6 × 150 mm, 5 μm, 100 ?）色谱柱进行食品中低聚半乳糖检测，各化合物分离度、线性、灵敏度均满足GB 5009.289-2023《食品中低聚半乳糖的测定》的要求。