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卻普曼瓊脂培養(yǎng)基原理及現(xiàn)象
閱讀：400 發(fā)布時(shí)間：2025-2-14一、用途及原理
該培養(yǎng)基用于金黃色葡萄球菌的檢測。
蛋白胨、酵母浸粉提供細(xì)菌生長所需的基本營養(yǎng)，磷酸氫二鉀為緩沖劑，甘露醇為可發(fā)酵碳源，較高濃度的氯化鈉可抑制不耐鹽細(xì)菌的生長，高濃度的硫酸銨可使明膠發(fā)生沉淀析出，培養(yǎng)基呈不透明狀。金黃色葡萄球菌可耐高滲環(huán)境，能在此培養(yǎng)基中生長，將不溶性大分子的明膠分解為小分子可溶性的氨基酸，菌落周圍的培養(yǎng)基變?yōu)橥该鳡睢＝瘘S色葡萄球菌還可分解培養(yǎng)基中的甘露醇產(chǎn)酸，培養(yǎng)結(jié)束后，滴加酸堿指示劑可觀察產(chǎn)酸現(xiàn)象。
二、培養(yǎng)基配方（g/L）
蛋白胨 | 10.0 |
酵母浸出粉 | 2.5 |
磷酸氫二鉀 | 5.0 |
明膠 | 30.0 |
甘露醇 | 10.0 |
氯化鈉 | 55.0 |
硫酸銨 | 75.0 |
瓊脂 | 15.0 |
pH | 7.2±0.2 |
三、配制方法
稱取本品202.5g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝，121℃高壓滅菌15min，冷卻至45-50℃左右時(shí)，傾入無菌平皿，備用。
注：培養(yǎng)基中含有較多的明膠及硫酸銨，滅菌冷卻后應(yīng)搖勻立即在陰涼環(huán)境倒平板，使平板能夠快速凝固，制成的平板應(yīng)為均一渾濁不透明狀態(tài)。不可長時(shí)間在50℃左右保溫，培養(yǎng)基易凝固；傾注平板前必須搖勻且能保證倒好的平板能快速凝固，若制成的平板呈透明狀態(tài)，通常是因培養(yǎng)基未搖勻或凝固過慢導(dǎo)致的。
四、生長現(xiàn)象及結(jié)果觀察
接種以下質(zhì)控菌株，在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時(shí)：
質(zhì)控菌株 | 菌株編號(hào) | 生長情況 | 其他特征 |
金黃色葡萄球菌 | ATCC25923 | +++ | 菌落周圍有透明環(huán)，產(chǎn)酸 |
表皮葡萄球菌 | CMCC26069 | +++ | 菌落周圍有透明環(huán)，不產(chǎn)酸 |
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| 表皮葡萄球菌 | 金黃色葡萄球菌 |
發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸現(xiàn)象觀察：用棉簽除去平板上的菌落，在瓊脂表面滴加0.04%溴甲酚紫溶液，可同時(shí)在無菌落生長的空白位置加1滴做為對照，若滴加的溴甲酚紫變黃，說明該菌可發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸。
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