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乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基原理及實驗現(xiàn)象
閱讀：812 發(fā)布時間：2024-6-20一、用途：
用于乳酸菌的分離培養(yǎng)。
二、實驗原理：
胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、維生素、生長因子；葡萄糖提供碳源；磷酸氫二鉀為緩沖劑；枸櫞酸三銨、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵、吐溫-80和乙酸鈉為培養(yǎng)各種乳酸菌提供生長因子，吐溫80為乳酸桿菌提供所需的代謝脂肪酸；檸檬酸銨和乙酸鈉能夠抑制一些雜菌的生長，包括鏈球菌、霉菌和除乳酸桿菌外的大多數(shù)口腔微生物菌群；加入乙酸，使pH值降低，抑制了其它細菌的生長，有利于乳酸桿菌的分離；加入碳酸鈣是由于乳酸菌在培養(yǎng)基中產(chǎn)酸可以形成溶鈣環(huán)，便于區(qū)分；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
三、培養(yǎng)基配方（g/L）：
酵母浸粉 | 2.0 |
胰酪蛋白胨 | 10.0 |
磷酸二氫鉀 | 2.0 |
牛肉浸粉 | 10.0 |
硫酸鎂 | 0.2 |
葡萄糖 | 20.0 |
乙酸鈉 | 5.0 |
枸櫞酸三銨 | 2.0 |
硫酸錳 | 0.05 |
碳酸鈣 | 5.0 |
吐溫80 | 1.0 |
瓊脂 | 25.0 |
pH 6.0-6.5 25℃ | |
此配方可以進行改良或增加營養(yǎng)成分以獲得最佳的結果
四、試驗方法：
1、稱取本品82.25g，加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中，分裝三角瓶,每瓶 200ml，115℃高壓滅菌 15-20min，冷至 50℃左右時，傾入無菌平皿，備用。
2、制備質控菌液。
3、用1μL接種環(huán)取非目標菌質控菌液1環(huán)，將接種環(huán)接觸容器邊緣3次去除多余液體，在平板表面劃三區(qū)，同時接種兩個平板。
4、36±1°C下培養(yǎng)24-48小時，記錄實驗結果。
五、結果觀察與解釋：
接種以下質控菌株，在36±1℃下培養(yǎng)24-48小時：
質控菌株 | 菌株編號 | 接種量(CFU) | 方法 | 質控評定標準 | 其他特征 |
嗜酸乳桿菌 | CICC6005 | / | 定性 | +++ | 白色突起菌落，有溶鈣環(huán) |
植物乳桿菌 | ATCC8014 | / | 定性 | +++ | 白色突起菌落，有溶鈣環(huán) |
圖1 植物乳桿菌微生物質控結果
六、注意事項：
本培養(yǎng)基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉載。