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單層細胞系傳代培養(yǎng)指南2023/3/31
大多數(shù)細胞系和原代細胞培養(yǎng)物生長為單一厚度的細胞層（單層）或附著在玻璃或經(jīng)過特殊處理的塑料基質(zhì)上的薄片。為了保持培養(yǎng)物的健康和積極生長，通常需要定期對它們進行傳代培養(yǎng)。常見的傳代培養(yǎng)方法涉及通過使用蛋...
hTERT-成纖維細胞培養(yǎng)解決方案2023/3/29
hTERT成纖維細胞為永生化子宮內(nèi)膜成纖維細胞(THESC)具有延長的壽命，并且在核型、形態(tài)和表型方面與原代親代細胞相似。在功能上，THESCs顯示激素治療后蛻膜化的生化終點。THESCs來源于從患有...
CRISPR-Cas9基因編輯實驗中的注意事項2023/3/29
在細胞上做基因研究的一般的過程就是：利用CRISPR-Cas9先做基因除(GeneKnockout)，獲得基因敲除細胞系純合細胞：然后分析相關的生物學表型；最后做為對照還需要將原敲除的基因回補會到原細...
細胞培養(yǎng)基pH值對細胞的影響2023/3/28
細胞培養(yǎng)基pH值對細胞的影響培養(yǎng)基是用來供給細胞營養(yǎng)，促使細胞增殖的，也是細胞賴以生長的環(huán)境。細胞培養(yǎng)實驗中用量最多的就是細胞培養(yǎng)基，雖然細胞培養(yǎng)試驗基本技術大同小異，但是每種細胞的培養(yǎng)條件卻相差甚遠...
菌種保存常用的五種方法2023/3/27
各種微生物由于遺傳特性不同，因此適合采用的保藏方法也不一樣。一種良好的有效保藏方法，首先應能保持原菌種的優(yōu)良性狀長期不變，同時還須考慮方法的通用性、操作的簡便性和設備的普及性。下面介紹幾種常用的菌種保...
大腸桿菌分離用什么培養(yǎng)基2023/3/8
培養(yǎng)基作為細胞的“食物”，是細胞培養(yǎng)和發(fā)酵的基礎，大腸桿菌在不同的培養(yǎng)基中培養(yǎng)可能會表現(xiàn)出不同的性狀，而利用這些性狀的不同，可將部分菌種進行區(qū)分或分離，此外，根據(jù)目標菌種選擇合適的培養(yǎng)基可以低成本、穩(wěn)...
發(fā)酵工程培養(yǎng)基有哪些2023/3/8
發(fā)酵工程培養(yǎng)基主要使用發(fā)酵培養(yǎng)基：發(fā)酵培養(yǎng)基是指為了在生產(chǎn)中更加利于菌種代謝產(chǎn)物的生成而設計的培養(yǎng)基，這類培養(yǎng)基常見的主要有以下幾種：SOB（SuperOptimalBroth）培養(yǎng)基：是一種富營養(yǎng)培...
流式細胞技術介紹2023/3/2
流式細胞技術是一項廣為使用、基于激光的生物學技術，利用流式細胞儀對處于快速流動的熒光染色的細胞或生物顆粒進行多參數(shù)、快速的定量分析和分選，是當代主要的細胞定量分析技術之一。主要有以下幾個特點：1.只要...
Transwell實驗的步驟2023/3/2
本文主要介紹4種Transwell實驗的實驗步驟，具體包括：Transwell腫瘤細胞遷移實驗、Transwell上皮細胞培養(yǎng)實驗、TranswellB16細胞的體外遷移實驗、Transwell內(nèi)皮細...
重組蛋白表達技術要點2023/3/1
大腸桿菌（E.coli）表達重組蛋白的技術經(jīng)過多年的發(fā)展，已經(jīng)成為一個非常成熟表達系統(tǒng)。為了在大腸桿菌表達體系中獲得可溶以高表達產(chǎn)量的蛋白，一個優(yōu)秀的表達策略是重要的。為了高效表達有活性蛋白，一般需考...
凝膠電泳的染色方法2023/3/1
凝膠電泳是研究蛋白質(zhì)性質(zhì)的一種相對簡單、快速和高靈敏度的工具。它是分析化學、生物化學和分子生物學的主要工具。通過電泳分離蛋白質(zhì)是基于這樣一個事實，即帶電分子將在施加電場時通過基質(zhì)遷移。蛋白質(zhì)電泳分離的...
Vero細胞無血清懸浮培養(yǎng)技術驗證2023/3/1
大多數(shù)用于抗體生產(chǎn)的細胞主要基于動物細胞上的開發(fā)，如MRC-5人二倍體細胞、Vero猿猴腎上皮細胞、Madin-Darby犬腎(MDCK)細胞和雞胚成纖維細胞。尤其是來自非洲綠猴腎臟的Vero細胞已被...
一文了解細菌內(nèi)毒素2023/2/28
內(nèi)毒素(Endotoxin)是一種脂多糖(LPS)，來源于革蘭氏陰性細菌外膜，其細胞壁外膜的外部脂質(zhì)成分由內(nèi)毒素分子組成，細胞死亡或分解后被釋放出來。LPS具有三個結構，由菌體特異性多糖、非特異性核心...
細胞支原體污染的原因有哪些2023/2/28
細胞支原體污染的原因?qū)τ谏飳嶒炂鞑募毎囵B(yǎng)來說，如何預防細胞的支原體污染是每一個細胞培養(yǎng)者的都會考慮的問題，據(jù)統(tǒng)計，在細胞污染原因分析中有超過60%的細胞培養(yǎng)物污染都是由支原體所引起的。那么細胞支原...
細胞支原體污染怎么處理2023/2/28
用肉眼或光學顯微鏡檢測支原體比較困難，所以支原體檢測一般會通過PCR的檢測、DNA染色、熒光標記、瓊脂平板接種等方法來實現(xiàn)。在支原體檢測之前，細胞應連續(xù)培養(yǎng)至少兩周，以便有時間讓低水平的污染物生長。對...
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