卡爾費休法測定各種物質(zhì)中微量水分的原理：在水存在時，即樣品中的水與卡爾費休試劑中的SO2與I2產(chǎn)生氧化還原反應(yīng)。
    
       I2 + SO2 + 2H2O → 2HI + H2SO4
    
       但這個反應(yīng)是個可逆反應(yīng)，當(dāng)硫酸濃度達到0.05%以上時，即能發(fā)生逆反應(yīng)。如果我們讓反應(yīng)按照一個正方向進行，需要加入適當(dāng)?shù)膲A性物質(zhì)以中和反應(yīng)過程中生成的酸。經(jīng)實驗證明，在體系中加入吡啶，這樣就可使反應(yīng)向右進行。
    
       3C5H5N+H2O+I2+SO2 → 2氫碘吡啶+硫酸酐吡啶

       生成硫酸酐吡啶不穩(wěn)定，能與水發(fā)生反應(yīng)，消耗一部分水而干擾測定，為了使它穩(wěn)定，我們可加無水甲醇。

       硫酸酐吡啶 + CH3OH（無水）→ 甲基硫酸吡啶
    
       總反應(yīng)式：

       I2+SO2+H2O+3吡啶+CH3OH→2氫碘吡啶+甲基硫酸吡啶

       從反應(yīng)式可以看出1mol水需要1mol碘，1mol二氧化硫和3mol吡啶及1mol甲醇而產(chǎn)生2mol氫碘吡啶、1mol甲基硫酸吡啶。這是理論上的數(shù)據(jù)，但實際上，SO2、吡啶、CH3OH的用量都是過量的，反應(yīng)完畢后多余的游離碘呈現(xiàn)紅棕色，即可確定為到達終點。

       I2:SO2:C5H5N = 1:3:10