产品名称：BioLife CryoStor CS10 GMP冻存液 现货供应

产品货号：210102

产品介绍：

BioLife Solutions CryoStor®是BioLife公司特别优化的细胞冻存液，在极低温度 (-70ºC to -196ºC)下准备和保存细胞。预混DMSO，为细胞和组织的冷冻、储存和解冻过程提供安全的?；せ肪?。CryoStor®通过调控冻存过程的分子生物学反应，无血清、蛋白或具有高细胞毒性的试剂，就能增强细胞活力和功能。

CryoStor使用说明书

准备细胞

1. 待冷冻细胞配制悬液（机械法或酶法解离）。

2. 细胞悬液离心获得沉淀。

3. 去除上清液 - 注意：尽可能多地移除培养基，以降低CryoStor®冻存液被稀释程度。

细胞冻存

4. 分离：加入预冷的（2-8°C）CryoStor®冻存液。

a. 细胞密度：0.5-10×10⁶  细胞/ mL，常规细胞培养方案（细胞密度可以更高）。

b. CryoStor®冻存液已经混合了DMSO，不需要再添加其他任何冻存剂。

5. 预冷：细胞/CryoStor®混合悬液2-8°C孵育约10分钟。

6. 成核：-70°C冷冻样品（许多方案交替使用-70°C和-80°C）

a. 大多数哺乳动物细胞，使用程序降温法 (-1°C/min)或类似方法。

b. 程序降温盒或异丙醇容器需要预冷到 2-8°C。

c. 约-5℃时 （-70°C冷冻约15-20min后）启动样品内的冰核形成（seeding），启动方法可以是程序降温仪控制的液氮喷放或是机械搅拌样本（轻弹或轻拍）。

d. 使用异丙醇容器的冷冻时间（-70°C）建议为3-4小时。

保存样本

7.样本保存

a. 长时保存温度液氮-130°C以下。

b.  -80°C 保存建议只能用于短时期保存，几周到几月。

样本解冻

8. 解冻复苏：37°C水浴快速解冻样本。

a. 解冻时轻轻摇晃，直到看不到任何冰块。1mL冻存管样本解冻时间大约3分钟。

b. 样本不能在结冰点以上加热（0-10°C）。水浴中拿出来时，冻存管触感是冷的。不推荐被动解冻。

9. 立即用培养基稀释细胞/CryoStor®混合物。

a. 稀释步骤可以一步完成。

b. 稀释用培养基温度为20°C到 37°C。

c. 推荐稀释比例≥1:10 （样本：培养基）

10.合适的条件下培养细胞。

11. 使细胞进入培养环境或立即使用细胞。

12. 解冻后24h进行细胞活力检测。*

注意：细胞活力检测应该在解冻后24h进行，以保证结果准确，并且以非冷冻样本作为对照。

*解冻后立即使用细胞膜完整性指示剂进行样本检测，如台盼蓝，分析样本细胞产量和活力，结果一般会高于正常值。

推荐使用更准确的活力检测方法，活死细胞荧光分析或代谢分析（MTT or alamarBlue®）。

同时推荐视觉观察方法，细胞贴壁和“漂浮”情况。

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产品货号：210102