在日常培养过程中发现RAW264.7细胞容易出现的问题主要为以下几种：

1.复苏不易成功2.细胞形态变异明显3.消化困难4.细胞生长缓慢，当你的细胞培养遇到上述瓶颈，不妨试一试以下几种解决办法。

1、复苏难以成功

原因：RAW264.7对空间十分敏感，复苏密度太高，细胞增殖太快，加剧细胞营养缺失，加速细胞老化。

解决办法：T75培养瓶复苏细胞数量控制在104~105

2、细胞变异明显

原因：细胞吞噬抗原过多、培养环境恶劣都会促使该细胞呈现梭形、长梭形

解决办法：改善细胞培养环境，例如与细胞接触的玻璃器皿均高温灭菌，换flask培养瓶，采用一次性器具，使用质量较高的胎牛血清

3、消化困难

原因：细胞老化后，细胞伪足多且长，使细胞难消化，使用胰酶或细胞刮会对细胞损伤较大

解决办法：无需胰酶使用吸管重复吹打，可消化大部分正常状态的细胞；但若细胞为“长脚"状态，即使加入胰酶消化超过10min，也难以消化下来，勉强消化，对后续的实验数据也有较大影响。

4、生长缓慢

原因：支原体污染会导致细胞生长缓慢，甚至难以贴壁

解决办法：定期进行支原体检测，如发现支原体污染，即刻使用支原体去除试剂