1. 概要

*是黃曲霉和寄生曲霉的有毒的代謝產(chǎn)物，主要存在于谷物、堅(jiān)果和飼料中。1993年*B1被世界衛(wèi)生組織（WHO）的癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為Ⅰ類(lèi)致癌物，是一類(lèi)毒性*的劇毒物質(zhì)。它被證明對(duì)人和動(dòng)物的肝臟、腎臟等組織和器官具有很大的危害。中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：*B1在玉米、大米、小麥中*分別不得超過(guò)20、10、5μg/kg，各種飼料中*B1的*為10-50μg/kg。

1. 原理

測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原-抗體反應(yīng)。微孔板上包被有抗抗體。加入*B1（AF-B1）標(biāo)準(zhǔn)品或樣品、酶標(biāo)抗原和抗體后，游離的*B1與酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體，抗體或抗體結(jié)合物與固定在微孔板上的抗抗體再結(jié)合，沒(méi)有結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)抗原及抗體被洗去，加入TMB底物顯藍(lán)色，加入終止液后顏色由藍(lán)變黃，用酶標(biāo)儀在450nm處檢測(cè)，吸光值與樣品中*B1含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出*B1的含量。

1. 試劑盒的組成

1. 包被有抗抗體的96微孔板：1塊（96 孔，12條×8 孔）
2. AFB1標(biāo)準(zhǔn)品：0 ng/mL、0.1 ng/mL、 0.5ng/mL、1.0ng/mL、4.0ng/mL                     1瓶 × 1.0mL
3. AF-B1酶標(biāo)抗原               1 瓶 ×10mL
4. AF-B1抗體                   1 瓶 ×10mL
5. AF-B1稀釋緩沖液A：          1 瓶 × 50mL
6. AF-B1稀釋緩沖液B：          1 瓶 × 50mL
7. 10倍濃縮洗滌液              1 瓶 × 50mL
8. 顯色底物TMB：               1 瓶 × 17mL
9. 終止液：                     1 瓶 × 7mL
10. 試劑盒說(shuō)明書(shū)：               1份
11. 質(zhì)檢報(bào)告：                   1份

1. 需要的儀器、試劑

1）儀器   

1. 酶標(biāo)儀 450nm（iELisa全自動(dòng)酶標(biāo)儀或相當(dāng)者）
2. 微量移液器：20μL-200μL單道，100μL-1000μL單道, 50μL-300μL八道
3. 多功能旋轉(zhuǎn)混合器（或者搖床、高速均質(zhì)器）
4. 酶標(biāo)板振蕩器
5. 渦旋混合器
6. 氮?dú)獯蹈蓛x
7. 50mL離心管
8. 1.5mL離心管
9. 離心機(jī)
10. 定性濾紙
11. 過(guò)濾漏斗
12. 天平：感量0.01g

1. 試劑

1. 樣品提取液70%甲醇：取700mL甲醇，加300mL純水，混勻。
2. 純水（蒸餾水、去離子水）、正己烷、三氯甲烷、甲醇