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技術(shù)文章

掃描電鏡檢測透射電鏡技術(shù)服務2023已更新

閱讀:743          發(fā)布時間:2023-11-16

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透射電鏡是種高分辨率、高放大倍數(shù)的顯微鏡,是材料科學研究的重要手段,能提供微細材料的組織結(jié)構(gòu)、晶體結(jié)構(gòu)和化學成分等方面的信息。透射電鏡的分辨率為0.1~0.2nm,放大倍數(shù)為幾萬~幾十萬倍。

透射電鏡簡介:

透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,簡稱TEM),可以看到在光學顯微鏡下無法看清的小于0.2um的細微結(jié)構(gòu),這些結(jié)構(gòu)稱為亞顯微結(jié)構(gòu)或超微結(jié)構(gòu)。要想看清這些結(jié)構(gòu),就必須選擇波長更短的光源,以提高顯微鏡的分辨率。1932年Ruska發(fā)明了以電子束為光源的透射電子顯微鏡,電子束的波長要比可見光和紫外光短得多,并且電子束的波長與發(fā)射電子束的電壓平方根成反比,也就是說電壓越高波長越短。目TEM的分辨力可達0.2nm。

透射電鏡制備注意事項(細胞):

1、細胞數(shù)量:> 1*10的6次方;。

2、消化細胞時要注意不要過度,及時用含血清的培養(yǎng)液終止消化;

3、終止消化后,預冷的PBS (pH7.4 )洗細胞1-2次,離心( 1500rpm, 5min) 棄上清(細胞好收集在1.5ml 的EP管中);

4、加入1mL 2.5%戊二醛溶液(需用PBS配制該溶液),可用吸管輕輕吹散細胞,使細胞懸浮于固定液中;

5、4度固定過夜后寄出(寄送時加冰袋,并用2.5%戊二醛溶液將EP管中剩余空間充滿)。

透射電鏡實驗流程:

1、取材

2、固定

3、脫水

4、包埋

5、固化

6、超薄切片機切片(50-60 nm)

7、3%醋酸鈾-枸櫞酸鉛雙染色

8、透射電鏡觀察,拍片


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