貨號(hào)：CW001

CELL-WISE 293培養(yǎng)基品牌產(chǎn)品特點(diǎn):

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染用培養(yǎng)基，適用于HEK293細(xì)胞高密度懸浮培養(yǎng)

無(wú)蛋白、無(wú)動(dòng)物源、化學(xué)成分限定

即用型培養(yǎng)基,無(wú)需添加額外成分

CELL-WISE的293培養(yǎng)基參數(shù)規(guī)格：

外觀：

澄清透明紅色液體

滲透壓：

275±15 mOSM

pH:

6.9-7.4

無(wú)菌檢測(cè):

無(wú)菌

內(nèi)毒素：

<5 EU/mL

儲(chǔ)存條件

：2-8℃，避光

效期：

12個(gè)月

產(chǎn)品用途：

僅用于科學(xué)研究，不適用于人類(lèi)或動(dòng)物的診斷和治療

CELL-WISE的293培養(yǎng)基使用方法：

細(xì)胞馴化

1）直接馴化

大部分情況下，培養(yǎng)于其他培養(yǎng)基中的細(xì)胞，可以直接適應(yīng)Balance CD 293 medium，只要按照日常傳代方式（稀釋?zhuān)└鼡Q培養(yǎng)基即可。

2）漸進(jìn)式馴化

注意：選用低代次、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行馴化

①在原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細(xì)胞并繼續(xù)使用該培養(yǎng)基傳代2到3次至細(xì)胞生長(zhǎng)穩(wěn)定，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到2x10 6 cells/ml后進(jìn)行傳代，傳代細(xì)胞密度控制在0.5-0.6×10 6 cells/mL，5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為75:25；

②將細(xì)胞置于37℃，5% CO2，轉(zhuǎn)速為110-175 rpm的恒溫?fù)u床中進(jìn)行培養(yǎng)；

③當(dāng)細(xì)胞密度3-4天后達(dá)到3x10 6 cells/ml且細(xì)胞活率>90%，傳代時(shí)5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為50:50，細(xì)胞密度控制在0.5×10 6 cells/mL。如細(xì)胞生長(zhǎng)慢，可離心上清，留20%條件培養(yǎng)基，加入80%的5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基比例為75:25的混合培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)；

④重復(fù)步驟③逐步增加Balance CD 293培養(yǎng)基所占的比例(5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基的比例為25:75至10:90）直到100%的Balance CD 293培養(yǎng)基；

⑤經(jīng)過(guò)在100%的 Balance CD 293 培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng)，傳代后3-4天細(xì)胞的密度可以達(dá)到2-3×10 6 cells/mL，細(xì)胞活率大于90%，這說(shuō)明細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了Balance CD 293 培養(yǎng)基。之后進(jìn)行細(xì)胞的傳代培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞的起始密度可以降到0.3×10 6 cells/mL，般傳代2-3次后再進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。

注意: 般細(xì)胞馴化過(guò)程中，三代細(xì)胞的狀態(tài)可能不是很好，但般從第四代狀態(tài)會(huì)有改善。