国产日产欧美精品-亚洲国产综合久久精品-色综合色国产热无码一-亚洲欧美日本国产,免费观看一区二区三区_在线观看片A免费不卡观看_亚洲а∨天堂久久精品_99久无码中文字幕一本久道

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊

當前位置:
上海創(chuàng)凌生物科技有限公司>技術(shù)文章>EZ細胞及動物組織RNA直擴RT-PCR試劑盒(一步法)

技術(shù)文章

EZ細胞及動物組織RNA直擴RT-PCR試劑盒(一步法)

閱讀:1079          發(fā)布時間:2021-12-28

EZ細胞及動物組織RNA直擴RT-PCR試劑盒(步法) 不需提取細胞RNA,經(jīng)過30分鐘簡單處理后,直接進行RT-PCR擴增??捎糜诩毎虻目寺 ⒒虮磉_定量、RNA病毒基因的擴增、RNA病毒PCR診斷、RNA病毒Real-time PCR診斷等。

產(chǎn)品資料

產(chǎn)品名稱:EZ細胞及動物組織RNA直擴RT-PCR試劑盒(步法)

英文名稱:EZ Cell and Tissue RNA Direct PCR Kit(One Step)

產(chǎn)品規(guī)格:30T/100T

試劑盒應(yīng)用:細胞組織或細胞基因的擴增與克隆、RNA病毒基因的擴增、RNA病毒PCR診斷、RNA病毒Real-time PCR.。

試劑盒組成:RNA-EZ-1、RNA-EZ-2、RNA-EZ-3、RNA-EZ-4、RT-Enzyme、2*RT-Buffer、ddH2O

保存條件:-20oC保存。使用將RNA-EZ-1、RNA-EZ-4在室溫或37oC充分溶解。RNA-EZ-3、RNA-EZ-4和RT-Enzyme使用時需置于冰上。

使用方法:

細胞中RNA的擴增

(1)將6ul RNA-EZ-1與3ul RNA-EZ-2充分融合。

(2)取20ul細胞懸液(10^5-10^6cells/ml),加入上述混合液,混勻。

(3)置于37oC靜置10分鐘。

(4)加入1ul RNA-EZ-3,混勻。

(5)置于37oC靜置15分鐘。

(6)置于98oC加熱5分鐘。

(7)加入60ul的RNA-EZ-4,混勻。

(8)取2ul(7)中處理液進行RT-PCR擴增。

組織塊中RNA的擴增

(1)用 H2O 將 RNA-EZ-1 稀釋 5 倍,每 25 μL 的 RNA-EZ-1 稀釋液中加入 3 μL 的 RNA-EZ-2,混合均勻。同時處理多個組織塊時,可以按照以上比例配制預(yù)混液并分裝到每個離心管 26 µL。

(2)切取半顆米粒大小的組織塊(< 3 mm3),*浸入上述混合液中。

(3)置于 37oC 靜置 10 分鐘。

(4)加入 1µL RNA-EZ-3,混勻。

(5)置于 37oC 靜置 15 分鐘。

(6)置于 98oC 加熱 5 分鐘。

(7)加入 60 μL RNA-EZ-4,混勻。

(8)取 2 μL(7)中處理液進行 RT-PCR 擴增。

Real-Time PCR

取上述細胞或組織處理液,加入特異性引物和 TaqMan 探針,可進行特異性靶標 RNA 的絕對定

量檢測。如需進行 SYBR Green Real-time PCR,請選擇 EZ021-01/-02(EZ® Cell and Tissue RNA Direct

PCR Kit(One Step))。

注意事項

(1)取樣的細胞量應(yīng)當適中,濃度不宜過高或過低,處理后溶液應(yīng)當以透明為宜。

(2) 樣品處理過程中應(yīng)當防止交叉污染,推薦設(shè)置陰性對照參與處理過程,以檢測環(huán)境的污染。

(3)用本產(chǎn)品擴增的 RNA 不宜太長,1000bp 及以內(nèi)的片段佳,期研究中可擴增長達 1800bp的片段,擴增片段越長效率越低。擴增的成功率也與 RNA 的豐度、二結(jié)構(gòu)以及引物等有關(guān)。

(4)本產(chǎn)品同樣適用于相應(yīng)的細胞或組織中 RNA 病毒的 PCR、Real-Time PCR 診斷。

(5)2×RT-Buffer 中加入了染料和相應(yīng)試劑,可直接進行電泳,無需另加 Loading buffer。

(6)處理 96 孔板中的細胞時,可按照 ddH2O:RNA-EZ-1:RNA-EZ-2=20:5:3 的比例配制預(yù)混液,使用多道移液器直接加入 96 孔板經(jīng) DPBS 洗滌的細胞中,實現(xiàn)高通量操作。

(7)2×RT-Buffer 中的染料不影響 TaqMan 探針的效果。

某皰疹病毒的Taqman探針法定量檢測。將病毒進行連續(xù)10倍稀釋,用EZ010試劑盒處理后,加入特異性Taqman探針,進行qPCR擴增,檢測曲線呈現(xiàn)明顯的梯度關(guān)系,樣品間重復性良好,Ct值線性模擬R2=0.9978

某皰疹病毒的Taqman探針法定量檢測。將病毒進行連續(xù)10倍稀釋,用EZ010試劑盒處理后,加入特異性Taqman探針,進行qPCR擴增,檢測曲線呈現(xiàn)明顯的梯度關(guān)系,樣品間重復性良好,Ct值線性模擬R2=0.9978


收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~

對比框

產(chǎn)品對比 產(chǎn)品對比 聯(lián)系電話 二維碼 意見反饋 在線交流

掃一掃訪問手機商鋪
在線留言
呈贡县| 阿勒泰市| 当阳市| 庆阳市| 江永县| 古蔺县| 临桂县| 蚌埠市| 高台县| 垦利县| 连平县| 琼海市| 平和县| 竹山县| 阜平县| 宁德市| 禄丰县| 太原市| 富阳市| 大足县| 贞丰县| 天峻县| 海宁市| 延津县| 正宁县| 嫩江县| 潜山县| 丰原市| 三台县| 福贡县| 环江| 东兴市| 怀宁县| 茶陵县| 洛宁县| 确山县| 连云港市| 西贡区| 奎屯市| 济阳县| 阿图什市|