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技術(shù)文章

免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析(IP-MS)原理

閱讀:4789          發(fā)布時(shí)間:2021-11-17

免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析(IP-MS)原理

 

免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析(IP-MS)原理介紹:

蛋白質(zhì)相互作用(Protein-Protein Interactions, PPIs)和翻譯后修飾(Post-Translational Modifications, PTMs)的數(shù)據(jù)是能顯著提高基礎(chǔ)類研究文章檔次的主要內(nèi)容。篩選和發(fā)現(xiàn)目的蛋白(target)在細(xì)胞中新的互作蛋白或者新的后修飾,免疫沉淀(IPImmunoprecipitation)結(jié)合LC-MS(液相色譜-質(zhì)譜連用,蛋白質(zhì)組學(xué)研究的核心工具)是目前的主流技術(shù)方案(IP-MS)。通過一次IP-MS實(shí)驗(yàn),能高通量的鑒定和篩選到多個(gè)與要研究的目的蛋白(target)存在相互作用的蛋白質(zhì)(蛋白質(zhì)復(fù)合物組分),從而擁有屬于自己的專屬蛋白質(zhì)相互作用數(shù)據(jù)庫,通過深入的生物學(xué)功能與分子機(jī)制的分析,能發(fā)表多篇連續(xù)性的學(xué)術(shù)文章。

免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析(IP-MS)應(yīng)用領(lǐng)域:

免疫沉淀和質(zhì)譜聯(lián)用(IP-MS),可用來確認(rèn)抗體與預(yù)期靶標(biāo)的特異性相互作用。在現(xiàn)有的抗體驗(yàn)證方法中,這種方法的特別之處在于可以主動(dòng)識(shí)別和定量純化自樣本的實(shí)際抗體靶標(biāo)。與其他評(píng)估抗體特異性的技術(shù)(如,通過對(duì)基因敲除小鼠來源樣本進(jìn)行免疫印跡染色,確定某個(gè)消失的條帶)不同,質(zhì)譜法可以直接確定來源于樣本蛋白的肽段序列。因此,IP-MS是確認(rèn)抗體與預(yù)期靶標(biāo)直接結(jié)合的較好方法。


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