详细介绍
rLV-Ubi-LifeAct慢病毒载体 现货
rLV-Ubi-LifeAct慢病毒载体 现货
应用领域
- 细胞骨架组织:
-无毒肌动蛋白可视化
-荧光染色 - 细胞骨架动力学:
-细胞过程中的肌动蛋白动力学
- 活细胞成像和显微镜检查
技术特点
- *的生物相容性-活体样品的无毒染色
- 容易产生稳定的细胞系
- 用于体外和体内应用
技术指标
浓度 | 1 x 10 7 TU /毫升 |
存储 | -80°摄氏度 |
TagGFP2(Ex max / Em max) | 483/506纳米 |
TagRFP(Ex max / Em max) | 555/584纳米 |
注意:
请注意,您将使用包含传染性病毒的产品。对于所有含有BSL-2生物的材料,遵循推荐的NIH指南。
了解更多
请在此处找到有关肌动蛋白可视化的更多详细信息。
在此处下载完整的“ Actin可视化”应用指南,以PDF格式。
LifeAct是一种17个氨基酸的肽,来源于酿酒酵母的一种蛋白质。LifeAct对活的或固定的真核细胞和组织中的丝状肌动蛋白(F-actin)结构进行染色。
请在此处找到有关LifeAct的详细信息。
源自人类免疫缺陷病毒(HIV-1)的慢病毒载体已成为将基因传递至哺乳动物细胞的主要工具。慢病毒载体的利特征是能够在体外和体内介导有效的转导,整合和长期表达进入分裂和非分裂细胞的能力。
具有水泡性口炎病毒包膜G(VSV-G)蛋白的假型包膜扩大了靶细胞范围。慢病毒载体现已显示可将基因传递至神经元,淋巴细胞和巨噬细胞。先前的逆转录病毒载体无法用于这些细胞类型。此外,慢病毒载体已被证明可有效地体内转导脑,肝,肌肉和视网膜,而无任何毒性作用或免疫反应。
所提供的慢病毒是VSV-G假型泛嗜性病毒,它既可以感染分裂细胞也可以感染非分裂细胞,同时能够稳定整合到细胞基因组中。
用rLV-LifeAct转导细胞后,使用荧光标记TagGFP2或TagRFP **可视化F-肌动蛋白。使用这种方法,即使在难以转染的细胞类型(例如原代细胞(例如神经元细胞))中,也可以实现高达100%的转导效率。该病毒可用于产生稳定的细胞系,并可通过荧光分选选择稳定的克隆。
当需要瞬时或稳定表达LifeAct时,LifeAct质??捎糜谛矶嘞赴嘈汀T谡庵智榭鱿?,研究人员可以在两种不同的启动子之间进行选择:CMV(巨细胞病毒)或CAG(修饰的鸡β-肌动蛋白)。
腺病毒载体可用于难以转染的细胞,或需要高达100%转基因表达的细胞。在这种情况下,也可以在前面提到的两个启动子之间进行选择。这些载体适用于仅需要LifeAct-TagGFP2或LifeAct-TagRFP瞬时表达的应用。
方法比较:使用LifeAct在活细胞中可视化F-Actin
LifeAct-Plasmid | LifeAct-mRNA | LifeAct蛋白 | LifeAct- | LifeAct- | |
方法适用于1 | |||||
细胞系 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
原代细胞 | + | +++ | ++ | +++ | +++ |
非哺乳动物细胞 | -- | + | + | -- | -- |
转染稳定性 | |||||
短暂的 | 是 | 是 | 是 | 是 | 没有 |
稳定 | 是 | 没有 | 没有 | 没有 | 是 |
协议与分析 | |||||
协议简单 | +++ | ++ | ++ | +++ | +++ |
LifeAct读出开始 | 1-2天 | 几个小时 | 几分钟 | 1-2天 | 1-2天 |
LIFEACT读出持续时间 | 几天 | 几天 | 多1天 | 几天 | 几天 |
信号强度 | +++ | +++ | + | +++ | +++ |
额外好处 | |||||
防止过度表达的 假象 | -- | + | +++ | + | + |
预防病毒反应 | +++ | +++ | +++ | -- | -- |
转移 方法的生物相容性 | + | +++ | +++ | ++ | ++ |
肌动蛋白功能 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
安全考虑 | |||||
生物安全等级 | BSL1 | -- | -- | BSL2 | BSL2 |
1并非所有这些组合都已在所有指示的细胞类型中进行了测试。我们鼓励您使用此表作为指导,以了解如何地使用LifeAct系统。
注:杨清辰发布