以下是解決默克色譜柱常見問題的實用技巧：
一、柱壓問題
1.壓力過高
檢查流速：如果流速設置過高，會增加柱壓。適當降低流速，但要注意這可能會延長分析時間。例如，將流速從1.5ml/min降低到1.0ml/min，觀察柱壓是否下降到正常范圍。
檢查柱頭和柱尾：柱頭或柱尾堵塞是導致柱壓升高的常見原因。可能是由于樣品中的顆粒雜質或者緩沖鹽結晶造成的?？梢詫⑸V柱從儀器上取下，用合適的溶劑（如甲醇 - 水溶液）反向沖洗柱頭和柱尾，去除堵塞物。
檢查色譜柱溫度：溫度變化會影響流動相的黏度，進而影響柱壓。確保色譜柱的溫度設置正確且穩(wěn)定，避免溫度過高或過低。如果柱溫過高，可適當降低柱溫；如果過低，可適當提高柱溫。
2.壓力過低
檢查連接：查看色譜柱與儀器之間的連接是否緊密，有無泄漏。包括柱入口和出口的接頭，以及管路連接部分。如果有泄漏，重新連接并確保密封良好。
檢查泵系統(tǒng)：泵工作不正常可能導致壓力過低。檢查泵的密封圈是否完好，活塞是否正常工作等。如有故障，及時維修或更換泵部件。
二、默克色譜柱峰形問題
1.峰拖尾
調(diào)整流動相組成：改變流動相中有機溶劑和水的比例，或者添加適量的改性劑，可以改善峰形。例如，對于某些堿性化合物，在流動相中添加少量三乙胺可以減少峰拖尾。
檢查樣品溶解性：如果樣品在流動相中溶解性不好，也會導致峰拖尾。確保樣品完*溶解在流動相中，可以通過超聲處理或者改變?nèi)軇w系來提高樣品的溶解性。
檢查色譜柱性能：長期使用后，色譜柱的硅膠基質可能受損或者被污染，導致峰拖尾?？梢允褂眠m當?shù)那逑闯绦騺砘謴蜕V柱的性能，如用高比例的有機溶劑沖洗柱子。
2.峰前沿
優(yōu)化梯度洗脫程序：如果是梯度洗脫過程中出現(xiàn)峰前沿，調(diào)整梯度曲線可以使峰形得到改善。例如，采用更緩慢的梯度變化速率或者改變梯度的起點和終點。
檢查進樣量：進樣量過大可能導致峰前沿，適當減少進樣量可以避免這種情況。同時，確保進樣時樣品溶液的濃度適中。
三、默克色譜柱保留時間和分離度問題
1.保留時間改變
檢查流動相組成穩(wěn)定性：流動相組成的變化會直接影響保留時間。定期檢查流動相中各組分的比例是否正確，并且確保溶劑的純度。例如，如果使用的是混合有機溶劑，要防止其中一種溶劑揮發(fā)導致組成變化。
檢查柱溫穩(wěn)定性：柱溫的變化會引起保留時間的波動。保持柱溫恒定，避免環(huán)境溫度對柱溫的影響。如果柱溫控制不穩(wěn)定，可以檢查柱溫箱的加熱或冷卻系統(tǒng)是否正常工作。
檢查色譜柱老化情況：隨著使用次數(shù)的增加，色譜柱會逐漸老化，導致保留時間改變。如果懷疑色譜柱老化，可以用標準樣品進行測試，對比新色譜柱和舊色譜柱的保留時間差異。如果差異較大，可能需要更換色譜柱。
2.分離度降低
優(yōu)化色譜條件：通過調(diào)整流動相組成、柱溫、流速等因素來提高分離度。例如，降低流速可以使理論塔板數(shù)增加，從而提高分離度；或者改變流動相的極性，使樣品組分之間的分離效果更好。
檢查色譜柱性能：同峰形問題類似，色譜柱性能下降也會導致分離度降低。及時清洗和維護色譜柱，保證其良好的分離性能。
